Здесь можно найти учебные материалы, которые помогут вам в написании курсовых работ, дипломов, контрольных работ и рефератов. Так же вы мажете самостоятельно повысить уникальность своей работы для прохождения проверки на плагиат всего за несколько минут.

ЛИЧНЫЙ КАБИНЕТ 

 

Здравствуйте гость!

 

Логин:

Пароль:

 

Запомнить

 

 

Забыли пароль? Регистрация

Повышение оригинальности

Предлагаем нашим посетителям воспользоваться бесплатным программным обеспечением «StudentHelp», которое позволит вам всего за несколько минут, выполнить повышение оригинальности любого файла в формате MS Word. После такого повышения оригинальности, ваша работа легко пройдете проверку в системах антиплагиат вуз, antiplagiat.ru, РУКОНТЕКСТ, etxt.ru. Программа «StudentHelp» работает по уникальной технологии так, что на внешний вид, файл с повышенной оригинальностью не отличается от исходного.

Результат поиска


Наименование:


курсовая работа Приготовление фиксированных микропрепаратов длительного хранения

Информация:

Тип работы: курсовая работа. Добавлен: 02.05.13. Год: 2013. Страниц: 15. Уникальность по antiplagiat.ru: < 30%

Описание (план):




ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ
ОРЛОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ  УНИВЕРСИТЕТ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ
СПЕЦИАЛЬНОСТЬ «ФАРМАЦИЯ»
 
КАФЕДРА ОБЩЕЙ, БИОЛОГИЧЕСКОЙ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ХИМИИ И ФАРМАКОГНОЗИИ
Желтышева Г.В.                                               Студент 2 группы 3 курса
Курсовая  работа по фармакогнозии.
Приготовление фиксированных микропрепаратов  длительного хранения
 
Научный руководитель:__________________________________________________
                                       (должность, ученая степень, фамилия, имя, отчество полностью)
.    
 
 
 
 Работа  защищена « » 20___г
ОРЕЛ-2012г.
 

Содержание
 
 Введение
 
Глава 1. Предварительный этап подготовки сырья к изготовлению микропрепарата
          Способы подготовки образцов для приготовления фиксированных препаратов
          Фиксация микропрепарата как способ длительного хранения
          Общий алгоритм приготовления фиксированного (постоянного) микропрепарата.
Глава 2. Методика приготовления микропрепаратов различных морфологических групп.
          Методика приготовления микропрепаратов листьев, трав, цветков
          Методика приготовления микропрепарата цельной коры
          Методика приготовления микропрепарата цельных подземных органов
          Методика приготовления микропрепаратов цельных плодов и семян
          Приготовление микропрепаратов растительных порошков
Заключение
Список использованной литературы
 
 
 

Введение
 
Изготовление микропрепаратов  это неотъемлемая часть фармакогностического анализа, а точнее его части – микроскопического анализа, который предполагает выборку анатомических признаков лекарственного растительного сырья различной степени измельченности.
Целью микроскопического  анализа сырья является обычно установление его подлинности; поэтому, рассматривая его под микроскопом, необходимо сосредоточить все свое внимание на тех признаках, которые отличают определенный орган одного растения от того же органа другого растения. Такие признаки называются диагностическими, а микроскопический анализ сводится к их нахождению. Необходимо знать диагностические признаки каждого растительного органа и приготовлять препарат так, чтобы обеспечить наилучшую возможность их найти и рассмотреть.
Именно с этой целью  необходимо четко знать методы и приемы изготовления как временных, так и фиксированных микропрепаратов.
Фиксированные (постоянные) микропрепараты обладают одним из важным достоинством – они могут храниться десятки лет. Этот фактор позволяет не стоять медицине на месте, помогает ей двигаться вперед.
Техника приготовления  микропрепаратов довольно разнообразна. И зависит от состояния объекта, а также от его принадлежности к определенной морфрлогической группе – листья, кора, подземные органы, плоды.
Именно этот фактор обуславливает  цель данной курсовой работы – определить алгоритм технологии приготовления  фиксированных микропрепаратов длительного хранения для различных морфологических групп.
Значение выбранной темы для расширения научных знаний в фармацевтической области обуславливает актуальность данной работы.
Задачами работы являются:
      теоретическое освоение способов подготовки образцов для приготовления фиксированных препаратов;
      ознакомление с методикой приготовления постоянных препаратов различных морфологических групп.
 
 
 
  
 
 

Глава 1. Предварительный этап подготовки сырья к изготовлению микропрепарата.
 
      Способы подготовки образцов для приготовления фиксированных препаратов.
 
 
Начальным этапом изготовления микропрепаратов, как временных, так  и фиксированных (постоянных), является подготовка образца (сырья) к приготовлению. Анализ измельченного образца начинают с внешнего осмотра, который проводят на сухом материале визуально или с помощью лупы х 10, желательно при дневном освещении. Отмечают цвет, опушенность, наличие каких-либо дополнительных признаков, проверяют запах при растирании кусочков сырья между пальцами, определяют морфологическую группу ЛРС.
Сухое растительное сырье перед  работой следует размягчить. С учетом особенностей объекта применяют холодное размачивание, кипячение, размягчение в водных парах во влажной камере и другие.
Холодное размачивание. Самый распространенный способ размягчения сырья, рекомендуемый для всех органов растения. Исследуемое сухое сырье помещают в колбу со смесью вода—глицерин (2:1) или вода—96 %-ный спирт—глицерин (1:1:1) с добавлением фенола или другого консерванта. В течение 1—2 суток размачивают мелкие семена, плоды, листья, травы, цветки.
Коры, корни, корневища, твердые  плоды и семена с плотной кожурой, толстые стебли рекомендуется размачивать 3—5 суток. Для этих же объектов можно  воспользоваться мацерацией в воде в течение 1—3 ч для набухания; затем объекты переносят в смесь глицерина со спиртом (1:1) и выдерживают 1—3 суток. Для уплотнения тканей материал помещают на 20—30 мин в спирт или в смесь спирт—глицерин (2:1).
Размягчение в  парах воды. Главным отличием от холодного размачивания является отсутствие контакта сырья с водой. Способ более длительный, однако он гарантирует сохранность структуры и содержимого клеток, предохраняя его от вымывания, возгонки, чрезмерного набухания или ослизнения. Размягчение проводят во влажной камере, которой может служить колба или эксикатор с водой. Сырье в камере находится в чашке или стаканчике и увлажняется водяными парами. Объекты мягкие и тонкие оставляют в атмосфере камеры на сутки, твердые — на 2 и более суток.
Горячий способ размягчения.
Размягчение в воде. Наиболее простой и быстрый способ заключается в кипячении сырья в воде. Тонкие листья и цветки не требуют сложной и продолжительной подготовки. Их обычно размягчают, погружая в горячую воду. Небольшие кусочки растительного материала длиной 1—2 см обычно кипятят 3—5 мин; кору и подземные органы растений — 20—30 мин, в зависимости от плотности и степени одревеснения тканей.
Плоды и семена не кипятят, а распаривают: помещают в марлевом мешочке на 15—30 мин в пары кипящей воды так, чтобы они не были погружены в воду.
Nb! Следует помнить, что путем вымачивания или кипячения сырья в воде из клеток удаляется водорастворимое содержимое. Крахмальные зерна при кипячении в воде клейстеризуются.
Размягчение в растворе щелочи. Для размягчения и одновременного просветления кусочки листовой пластинки (с краем листа, участком главной жилки) помещают в фарфоровую чашку или химический стаканчик и кипятят в 3—5 %-ном растворе натрия (калия) гидроксида в течение 2—5 мин в зависимости от толщины объекта. Жидкость сливают, а сырье промывают водой. Обработанный материал оставляют в воде и готовят из него препараты с поверхности.
Препараты кожуры плодов и семян готовят после кипячения  в 5%-ном растворе натрия гидроксида в течение 15—20 мин, с последующим раздавливанием и разделением тканей.
Размягчение в  растворе хлоралгидрата. Для быстрого приготовления срезов коры и подземных органов их размягчают и просветляют кипячением в растворе хлоралгидрата в течение 10—20 мин.
Разрушение  тканей. В некоторых случаях требуется разрушение тканей. Для изучения отдельных элементов проводящих пучков и механических тканей кусочки сырья длиной 1—2 см или грубый соскоб нагревают (осторожно, под тягой!) в пробирке в смеси 2 мл кислоты азотной концентрированной и 0,3 г калия хлората (бертолетовой соли) до образования пены и оставляют на несколько минут до побеления кусочков. Сырье промывают несколько раз водой, помещают на предметное стекло, разделяют препаровальной иглой на отдельные элементы и просматривают в глицерине.
При исследовании сырья, содержащего секреторные ходы, млечники, вместилища со смолой или эфирным маслом, для разделения тканей без разрушения тонких оболочек клеток применяют следующие способы:
а) кипячение в 3—5 %-ном растворе щелочи в течение 30 мин;
 б) нагревание сырья  в колбе со шлифом в 25 %-ном  растворе аммиака в течение  40 мин. После кипячения частицы  сырья промывают водой, помещают  на предметное стекло и разделяют ткани препаровальными иглами.
1.2. Фиксация микропрепарата как способ длительного хранения.
Отличие временного препарата от постоянного заключается в том, что временный препарат может храниться  относительно не долгий отрезок времени, а постоянный – десятки лет.
Существуют готовые  наборы для изготовления постоянных препаратов. В их состав, как правило, входят: предметные стекла, покровные стекла, этикетки для микропрепаратов, готовые микропрепараты, пинцет, канадский бальзам, краситель метиленовый синий, краситель  Эозин, образцы плодовой мушки. Надо отметить тот факт, что такие наборы имеют свои ограничения для изготовления фиксированных (постоянных) препаратов.
Техника приготовления фиксированных микропрепаратов фармацевтических материалов разнообразна. Она зависит от состояния, в котором находится сырье — цельное, резаное или порошкованное, или от принадлежности его к определенной морфологической группе — лист, кора, подземный орган.1
Обязательным  условием для долгосрочного хранения препарата из растительного или животного материала является его фиксация.
Фиксация микропрепаратов - процедура прикрепления (фиксации) исследуемого материала, включая бактериальную суспензию, к поверхности предметного стекла. Фиксация микропрепаратов обеспечивает прикрепление микробов к стеклу для предупреждения их смывания в процессе последующей обработки; уничтожение микробов для обеспечения безопасности - работы с заразным материалом; предупреждение аутолиза клеток; лучшее восприятие красок. Осуществляют тепловым и химическим способами. При тепловой (жаром) фиксации высушенный препарат проводят 2 - 3 раза над пламенем горелки. Этот способ нарушает целость структур и может быть использован только по отношению к бактериям и грибам, имеющим толстую ригидную клеточную стенку. Менее глубокие изменения формы и структуры вызывает фиксацию с помощью растворов химических веществ или их смесей. Для фиксации микропрепаратов применяют метанол (5 мин), этанол (15 мин), смесь Никифорова (равные объемы этилового спирта и эфира) (15 мин), смеси Ценкера, Шаудина, Боуэна (смесь пикриновой кислоты -75 мл, формальна- 25 мл и ледяной уксусной кислоты - 5 мл). Фиксация микропрепаратов для электронной микроскопии должна минимально нарушать структуры объекта. Для этой цели используют глютаральдегид, тетраоксид осмия, обычно в щелочном фосфатном или ацетат - вероналовом буфере.
Фиксирующих жидкостей (фиксирующих сред) много, самые доступные из  них:  этиловый спирт  и продающийся в аптеках препарат на основе формалина – формидрон. Состав формидрона: 100 мл препарата содержат 10 г раствора формальдегида в пересчете на 37 % формальдегид; вспомогательные вещества: спирт этиловый 96 %, одеколон, вода очищенная.
Препарат формидрон может быть использован для создания архива биологических объектов, вспомогательные вещества входящие в аптечный препарат не сколько не мешают  в сохранении объекта.
Надо отметить, что формальдегид обладает раздражающим действием.
Если на дне банки  с 40 % формалином образовался осадок белого цвета (параформальдегид), то его  можно растворить, подогрев до 70-80 °С (в вытяжном шкафу или на открытом воздухе), и использовать для фиксации.
Спирт-формол по Шафферу - 10 %  формалин, который готовят из 1 части  40 % формалина и 2 - 3 частей 96 % спирта.
Продолжительность фиксации 24 - 48 ч. Дальнейшая промывка в воде не требуется, и материал сразу же помещают в 96 % спирт.
Выпадение белого осадка никак не сказывается на свойстве фиксатора.
В ходе приготовления микропрепаратов необходимо соблюдать правила техники безопасности при работе с реактивами, так как практически все фиксаторы относятся к токсичным веществам.
Фиксация необходима с целью остановки (прекращения) жизнедеятельности клеток. Для этого объект помещают на несколько часов в фиксатор.
 

1.3. Общий алгоритм приготовления фиксированного (постоянного) микропрепарата.
1. Изучаемый объект  помещают  в раствор 1части ФОРМИДРОНА  с 2 частями воды на несколько дней.
Для мазков это время  ограничивается 15 минутами и формидрон  разводить не следует.
2. После фиксации  объект  отмывают от фиксатора. С этой целью его помещают на несколько часов в проточную воду. Для удержания объекта при отмывке удобно поместить его  в ситечко-шарик для заваривания чая. Исследуемый объект переносят в батарею спиртов с целью удаления воды.
Мазки ополаскивают в проточной  воде в течение 3-5 минут. Струя воды должна быть не сильной, мазок сушат.
3. Далее если необходимо препарат может быть окрашен одним из доступных красителей.
4. После окраски препарат готовят  к заключению в монтирующую  среду.
Приготовить батарею (ряд флаконов) растворов спиртов для удаления воды.  Возможно использовать как этиловый спирт (антисептический раствор) так и Изопропиловый спирт (ИПС) который можно приобрести в магазинах специализирующихся на продаже радиодеталей.
Последовательно наливают в лабораторные стаканчики этанол или изопропанол в концентрациях 50%, 70%, 96%, 99%.
Объект помещают в  стаканчик,  начиная с 50% этанолом на 10 минут. Затем перемещают объект в стаканчики с все более высокой концентрацией спирта, выдерживая в каждом по 10 минут. В процессе такого перемещения этанол будет плавно вытягивать воду из объекта. Помещать объекты сразу в концентрированный этанол нельзя, так как в этом случае, быстро выходящая из клеток вода может повредить клеточные оболочки
Для мазков столь долгое пребывание в спиртах не нужно, достаточно 30-60 секунд, так как некоторые красители  могут вымываться из мазка.
5. Если заключить препарат  в канадский бальзам обезвоженный материал переносят в уайт-спирит  на 5-6 часов,  Канадский бальзам можно заменить на раствор канифоли  в  уайт-спирите, по консистенции напоминающий сироп.
6. Если препарат заключается в глицерин-желатиновую смесь, то объект переносят не уайт-спирит, а в глицерин на несколько часов (глицерин, аптечный)
Заключение объекта  в глицерин-желатин. На нагретое предметное стекло с помощью стеклянной палочки наносят каплю расплавленного глицерин-желатинового реактива. В каплю сразу же помещают размягченный объект или срез, который быстро накрывают покровным стеклом, избегая образования пузырьков воздуха. К препарату приклеивают этикетку с наименованием.
Приготовление глицерин-желатинового реактива. К 1,0 г чистого желатина приливают 50 мл воды для набухания. Излишек воды отцеживают, прибавляют 6 мл очищенной воды, нагревают до растворения желатина, к раствору прибавляют 7 г чистого глицерина и перемешивают. На 100 мл реактива в качестве консерванта прибавляют 1—2 кристаллика фенола. Смесь нагревают на водяной бане в течение 10—15 мин, пока раствор не станет прозрачным. Фильтруют на горячей стеклянной воронке через фильтровальную бумагу. При появлении осадка тщательно профильтруют через стекловату. Реактив хранят в конической колбе, закрытой корковой пробкой, в центр которой вставлена стеклянная палочка, доходящая почти до дна колбы.3
Небольшой кусочек глицерин-желатина иглой или скальпелем переносят  на предметное стекло. Последнее слегка нагревают на спиртовке, глицерин-желатин расплавляется. В него из глицерина переносится объект и покрывается покровным стеклом.
Мазок заключают  следующим образом, кусочек глицерин-желатина помещают на покровное стекло Последнее слегка нагревают на спиртовке, глицерин-желатин расплавляется, объект покрывается покровным стеклом.
Пространство между предметным и покровным стеклом заполняется  монтирующей средой, которая, соединяет покровное и предметное стекла и консервирует объект. Самым главным требованием к монтирующей среде является соответствие ее коэффициента преломления света к аналогичному показателю стекла.
7. Заключение объекта в канифоль  или канадский бальзам
На покровное стекло по центру наносят  каплю или, если стекло длинное, две  капли жидкого раствора канифоли. Покровное стекло помещают каплей вниз  и слегка прижимают
Края покровного стекла не следует  вытирать ватой или марлей, смоченной  ксилолом, так как при этом часть  смолы может растечься по чистой поверхности покровного стекла. Засыхая, она образует неровности, которые мешают наблюдению под микроскопом и от которых очень трудно избавиться.
В результате неполного  обезвоживания в окрашенных заключенных  препаратах часто образуются непрозрачные или мутные зоны. Под микроскопом  в таком участке среза и над ним обнаруживаются многочисленные мелкие капельки воды, окраска сильно выцветает. Чтобы избавиться от этого, снимают покровное стекло, смывают ксилолом синтетическую смолу или бальзам, обезвоживают срез в 100%-ном спирте, ацетоне или изопропиловом спирте, просветляют в смеси ксилола с обезвоживающим агентом и в 2-3 сменах свежего ксилола и вновь заключают.
Микропрепараты можно  разделить на сухие и влажные. Влажные препараты - препараты, в котором образец не может обходиться без воды, чтобы оставаться живым. Что касается сухих микропрепаратов, то для их приготовления не используется вода. На предметное стекло помещается очень тонкий срез образца, который накрывается покровным стеклом. После этого покровное стекло можно слегка придавить. Эту процедуру необходимо проводить в резиновых перчатках, во избежании следов.
 

Глава 2. Методика приготовления  микропрепаратов различных морфологических  групп.
Полный алгоритм техники  микроскопического анализа приведен и описан в общей фармакопейной  статье «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья»,  ГФ XI, выпуск 1.
2.1. Методика приготовления микропрепаратов листьев, трав, цветков
Растительный материал, отобранный для микроскопического  изучения, помещают в пробирку и проводят его обработку для просветления:
растительный материал заливают 2—3% раствором едкого натра  и кипятят в течение 1—2 мин. После этого жидкость осторожно сливают, а материал тщательно промывают водой и помещают в чашку Петри. 4
Кусочки сырья вынимают из воды с помощью скальпеля (или лопаточки) и препаровальной иглы и помещают на предметное стекло в каплю раствора глицерина или воды.
Допускается другой способ просветления – кусочки сырья  кипятят в пробирке в растворе хлорагидрата несколько минут (во полного просветления).5
На предметном стекле его кусочек 4 мм разделяют скальпелем или препаровальной иглой на две части; одну из них осторожно переворачивают, чтобы получить возможность наблюдать лист под микроскопом с верхней и нижней сторон.
Стекла, используемые для приготовления микропрепаратов, должны быть чистыми и сухими.
Препарат на предметном стекле накрывают  покровным стеклом. При неосторожном накладывании покровного стекла в препарате часто образуются пузырьки воздуха, поэтому стекло следует класть наклонно, прикоснувшись сначала одним краем к жидкости, а затем, придерживая стекло иглой, положить полностью. Попавшие пузырьки воздуха можно удалить легким постукиванием по покровному стеклу тупым концом препаровальной иглы или слегка подогреть над пламенем горелки. После охлаждения рассматривают под микроскопом, сначала при малом, затем при большом увеличении.
Если включающая жидкость не заполняет всего пространства между предметным и покровным  стеклом или она испарилась при  нагревании препарата, то ее добавляют сбоку небольшими каплями. Если наоборот, покровное стекло свободно плавает вследствие избыточного количества жидкости, то ее следует отсосать при помощи полоски фильтровальной бумаги, подведенной сбоку.
При приготовлении микропрепарата из толстых листьев предварительно раздавливают скальпелем толстые жилки, а с пластинки стараются снять эпидермис или, размяв лист, отделяют мезофилл от эпидермиса, чтобы препарат был более тонким.
2.2. Методика приготовления микропрепарата цельной коры
Готовят поперечные или  продольные срезы коры. Кусочки коры размером 2—3 х 0,5—1 см кипятят в пробирке с водой в течение 5 мин.
Размягченные куски выравнивают скальпелем так, чтобы они имели строго поперечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепараты в растворе глицерина.
Тонкие коры режут  в пробке, как при подготовке срезов из листьев и трав.6
Одревесневшие (лигнифицированные) элементы. К срезу на предметное стекло прибавляют несколько капель раствора флороглюцина и 1 каплю 25% раствора серной кислоты. Через минуту жидкость отсасывают полоской фильтровальной бумаги, срез заключают в раствор глицерина и закрывают покровным стеклом (рассматривают без прогревания); одревесневшие механические элементы окрашиваются в малиново-красный цвет.7
Крахмал. Для обнаружения  крахмала делают соскоб с сухой коры и рассматривают его в растворе Люголя. Крахмальные зерна окрашиваются в синий цвет.
2.3. Методика приготовления микропрепарата цельных подземных органов
Для изготовления микропрепарата необходимо подготовить поперечные и продольные срезы. Для размягчения небольшие кусочки размачивают в растворе глицерина в течении 1-3 суток в зависимости от твердости.8 Размоченные объекты выравнивают скальпелем или бритвой так, чтобы они имели строго поперечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепараты в растворе глицерина и рассматривают диагностические признаки сначала при малом, затем при большом увеличении. Сначала срезают бритвой более толстые, но цельные ломтики, затем делают срезы тонкие и более мелкие. Цельные ломтики окрашивают раствором анилина сульфата, флороглюцином с 25%-ной серной кислотой или раствором сафранина.
2.4. Методика приготовления микропрепаратов цельных плодов и семян.
Готовят препараты кожуры семени и околоплодника с поверхности и поперечные срезы.
Препараты кожуры семени и околоплодника с поверхности. 2—3 семени или плода кипятят в  пробирке в растворе 5% едкого натра  в течение 2—3 мин и тщательно промывают водой.
Объект помещают на предметное стекло, препаровальными иглами отделяют кожуру семени или ткани околоплодника и рассматривают их в растворе глицерина.
Срезы. Для приготовления  срезов сухие плоды и семена предварительно размягчают, поместив их на сутки во влажную камеру (влажной камерой  служит эксикатор с водой, в которую добавлено несколько капель хлороформа) или водяным паром в течение 15—30 мин или более в зависимости от твердости объекта.
Мелкие плоды и семена запаивают в парафиновый блок размером 0,5 х  0,5 х 1,5 см.
Кончиком нагретой препаровальной иглы расплавляют парафин и в образовавшуюся ямку быстро погружают объект.
Срезы объекта делают вместе с парафином; срезы выбирают из парафина препаровальной иглой, смоченной жидкостью, и готовят микропрепарат в растворе глицерина.
В порошке плодов диагностическое значение имеют обычно механические элементы, обрывки эфирномасличных канальцев (для зонтичных), иногда расположенные на эпидермисе плода волоски.9
При изучении семян под  микроскопом обычно обращают внимание на общее строение семени (характер кожуры, величину запасной питательной ткани — эндосперма, форму и расположение зародыша — корешка, семядолей, почечки зародыша).
Более детально изучают кожуру семени, которая почти всегда состоит из нескольких слоев характерного строения.
Наиболее важное диагностическое значение имеет механический слой кожуры, который состоит или из вытянутых элементов (типа волокон), или из округлых, изодиаметрических.
Строение эндосперма и тканей зародыша, как правило, у всех растений мало, чем отличается, поэтому не имеет диагностического значения.
 Лишь в некоторых  случаях (у семян чилибухи, плодов зонтичных) эндосперм имеет очень характерное строение и может в числе других служить диагностическим признаком.
2.5. Приготовление микропрепаратов растительных порошков.
  
Микропрепараты растительного  порошка всех морфологических групп  сырья готовят одинаково.
На предметное стекло вначале помещают 2—3 капли раствора хлоралгидрата или глицерина, а затем на кончике скальпеля или увлажненной препаровальной иглы вносят частицы порошка, перемешивают препаровальной иглой до равномерного смачивания всех частиц жидкостью, накрывают покровным стеклом и слегка придавливают ручкой иглы. Избыток жидкости удаляют полоской фильтровальной бумаги. Если жидкости под стеклом оказалось мало, ее добавляют пипеткой рядом с покровным стеклом (она быстро затягивается под стекло).
Микропрепараты прогревают над небольшим пламенем горелки  или на электроплитке до просветления тканей, не допуская высыхания. Держать  препарат при прогревании следует наклонно, под углом 10—15°,— так из объекта лучше удаляются пузырьки воздуха. Нельзя допустить резкого закипания жидкости, так как при этом частицы порошка не просветляются, а препарат заполняется пузырьками воздуха.
При исследовании порошка коры, подземных органов, плодов или семян основной микропрепарат готовят в растворе хлоралгидрата для изучения главных диагностических признаков, выявления слизи, алейроновых зерен, кристаллов и др. Для обнаружения крахмала микропрепарат приготовляют в воде или глицерине без нагревания. 10
Химические  реакции. Составной частью микроскопического анализа является проведение гистохимических реакций. С одной стороны, они позволяют установить наличие в ЛРС действующих веществ (жирное и эфирное масло, смолы, содержимое млечников, слизь, инулин, алкалоиды, дубильные вещества и др.) и нередко их локализацию в тканях растения. С другой стороны, при помощи гистохимических реакций определяют различные части клетки, характер оболочки, ее одревеснение, содержимое клеточного сока, включения. Необходимые гистохимические реакции проводят на поперечном срезе размягченного сырья или с порошком (соскобом) сухих органов растения.
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Заключение
Подводя итоги данной курсовой работы, хотелось бы изложить основные «постулаты» необходимые для приготовления фиксированных микропрепаратов.
Для приготовления препарата  из порошкованного объекта на предметное стекло наносят 1—2 капли соответствующей  включающей жидкости, смачивают в  ней кончик препаровальной иглы и берут ею столько порошка, сколько пристает на кончик; затем равномерно размешивают его в капле приготовленной на предметном стекле жидкости и покрывают препарат покровным стеклом, стараясь, чтобы под него не попал воздух; если жидкости под покровным стеклом окажется мало, ее добавляют, нанося пипеткой каплю жидкости рядом с покровным стеклом, под которое ее быстро затянет; если, наоборот, жидкости окажется много и она будет выходить из-под покровного стекла, ее убирают полоской фильтровальной бумаги.
Жидкость выбирают в  зависимости от объекта, подлежащего рассмотрению.
Если надо рассмотреть  кристаллы или строение отдельных  тканей, берут или просветляющую  жидкость, лучше всего раствор  хлоралгидрата, или воду. Для установления строения крахмальных зерен лучше брать воду, так как в растворе хлоралгидрата они растворяются. Далее выбирают жидкость, дающую микрохимическую реакцию на вещества, находящиеся-в рассматриваемом объекте.
Иногда приходится приготовлять несколько препаратов, чтобы рассмотреть все диагностические признаки.
Для рассмотрения под  микроскопом листья, травы и цветы, цельные или резаные, кипятят  в 3—5%-ном растворе едкой щелочи, для просветления, затем переносят  в небольшую чашечку и несколько  раз промывают водой, пока вода не перестанет окрашиваться в бурый цвет.
Для приготовления препаратов из цельных плодов и семян семена кипятят 1—2 мин в растворе едкой  щелочи; после этого семенная оболочка легко расслаивается иглой на предметном стекле на отдельные слои, которые помещают в разведенный  глицерин и рассматривают.
Для приготовления препаратов из резаной коры берут соскоб и  помещают его в раствор хлоралгидрата  или мелкие кусочки коры кипятят 3—5 мин в 5%-ном растворе едкой  щелочи, раздавливают их на предметном стекле и заключают в раствор  глицерина. Цельную кору предварительно замачивают в водном глицерине или, разломив на куски длиной 1—2 см и шириной около 0,5—1 см, кипятят с водой 1—3 мин. Цельные корни и корневища обычно не требуют анатомического исследования для определения подлинности.
 
 
 

Список использованной литературы
Научная литература:
    Чебышев Н.В., Гринева Г.Г. Биология. Учебное пособие для вузов. - Изд.: «ГЗОТАР-Медиа», М., 2008. - 415 с.
    Словарь медико-биологических терминов / Составители: В.И.Голубцов, Е.В. Сапсай - Краснодар,2007. - 31с.
    Клетка. Строение и основные функции. (Учебное пособие по цитологии) / Составитель: Чугунова А.Н. – Краснодар, 2005. - 58с.
    Государственная фармакопея СССР. 11-е изд. Вып. 1.М.: Медицина, 1989.-336 с.
    Государственная фармакопея СССР, 11-еизд. Вып. 2. М.: Медицина, 1989.-400 с.
    Андреева В.Ю, Калинкина Г.И., Сальникова Г.Н. Методы фармакогностического анализа лекарственных растительных средств, часть 1, Правила приемки и общие методы испытаний // учебное пособие для медицинских ВУЗов, Томск, СибГМУ, 2008 г. – 55 с.
    Методы фармакогностического анализа: макроскопия и микроскопия // учебное пособие для подготовки студентов к курсовому и государственному экзаменам по фармакогнозии, Владивосток, 2007 – 54 с.
    Г.П. Яковлева Лекарственное растительное сырье растительного и животного происхождения. Фармакогнозия // учебное пособие, СПб: СпеЛит, 2006 – 845 с.
    Методические указания по подготовке к практическим занятиям по фармакогнозии «Освоение фармакопейных методов определения подлинности различных морфологических групп ЛРС. Микроскопический анализ», Владивостокский ГМУ – Владивосток, 2011 г. – 14 с.
    Бабичев С.В., Коротяев А.И. Медицинская микробиология, имуннология и вирусология // 4-е издание, переработанное, дополненное // учебник для медицинских ВУЗов, Санкт - Петербург, СпецЛит – 2008 г.
    Зверев В.В., Бойченко М.Н.,
    и т.д.................


Перейти к полному тексту работы


Скачать работу с онлайн повышением оригинальности до 90% по antiplagiat.ru, etxt.ru


Смотреть полный текст работы бесплатно


Смотреть похожие работы


* Примечание. Уникальность работы указана на дату публикации, текущее значение может отличаться от указанного.