На бирже курсовых и дипломных проектов можно найти образцы готовых работ или получить помощь в написании уникальных курсовых работ, дипломов, лабораторных работ, контрольных работ, диссертаций, рефератов. Так же вы мажете самостоятельно повысить уникальность своей работы для прохождения проверки на плагиат всего за несколько минут.

ЛИЧНЫЙ КАБИНЕТ 

 

Здравствуйте гость!

 

Логин:

Пароль:

 

Запомнить

 

 

Забыли пароль? Регистрация

Повышение уникальности

Предлагаем нашим посетителям воспользоваться бесплатным программным обеспечением «StudentHelp», которое позволит вам всего за несколько минут, выполнить повышение уникальности любого файла в формате MS Word. После такого повышения уникальности, ваша работа легко пройдете проверку в системах антиплагиат вуз, antiplagiat.ru, etxt.ru или advego.ru. Программа «StudentHelp» работает по уникальной технологии и при повышении уникальности не вставляет в текст скрытых символов, и даже если препод скопирует текст в блокнот – не увидит ни каких отличий от текста в Word файле.

Результат поиска


Наименование:


Реферат Как получить такие антитела? Дорогу указывают опухоли. Как это было сделано? Гибридомы. Моноклональные антитела. Применение. При введении в организм животных и человека чужеродных макромолекулярных веществ в крови появляются антитела.

Информация:

Тип работы: Реферат. Предмет: Медицина. Добавлен: 11.05.2003. Сдан: 2003. Уникальность по antiplagiat.ru: --.

Описание (план):


monax.ru/order/ - рефераты на заказ (более 2300 авторов в 450 городах СНГ).
Реферат студентки II лечебного факультета Аветян А.С
МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА
ВВЕДЕНИЕ
При введении в организм животных и человека чужеродных макромолекулярных веществ -- белков или полисахаридов (антигенов) в крови появляются защитные белки - антитела, для которых характерна необыкновенная, уникальная специфичность. Каждое антитело узнает только свой антиген, -точнее, одну его детерминантную группу. Детерминантная группа состоит из нескольких аминокислот (обычно из 6--8), образующих пространственную структуру, характерную для данного белка.
В одном белке, состоящем из нескольких сот аминокислот имеется несколько (5-15) разных детерминант, поэтому к одному белку образуется целое семейство различных по своей специфичности антител. Даже к одной детерминанте образуется целый спектр антител, отличающихся по структуре, степени специфичности и прочности связывания с ней. То же относится и к полисахаридным антигенам, детерминантные группы которых образуются 3--6 остатками моносахаридов.
Таким образом, при введении антигена возникает большое семейство антител, направленных к разным его детерминантам и различающихся так же внутри группы антител, направленных к одной и той же детерминанте. В крови иммунизированных животных появляется богатый и уникальный по составу спектр антител, который и обеспечивает абсолютную специфичность в распознавании данного антигена.
Антитела давно и широко используются для нейтрализации бактериальных токсинов (дифтерийного, столбнячного), змеиных ядов (кобры, гадюк) вирусов, попавших в кровь (особенно эффективно вируса кори), и для идентификации индивидуальных белков (и других антигенов), находящихся в клетке или сложнейших тканевых экстрактах. Однако иногда требуются не многокомпонентные смеси антител, возникающие в крови в ответ на введение антигена, а отдельные, элементарные составляющие этой смеси, направленные лишь к одной детерминанте антигена и имеющие одни и те же характеристики. Такие антитела бывают нужны как для изучения их собственной природы, так и для практического использования, например для ставки в опухоли токсических веществ.
КАК ПОЛУЧИТЬ ТАКИЕ АНТИТЕЛА?
Очевидно, что путем иммунизации, то есть вве-дением животному индивидуального антигена или только одной его детерминантной группы, это сде-лать, как правило, невозможно. Почему? Дело в том, что в организме в процессе созревания антителообразующих клеток (АОК) образуется большое количество -- миллионы генетически однородных семейств клеток -- клонов, каждый из которых спе-циализируется на синтезе только одного варианта антител, и в этом причина большого разнообразия антител, индуцируемых даже одним антигеном. Та-ких клонов много больше, чем требуется антител для распознавания любого, случайно взятого анти-гена. Антиген, попадая в организм, стимулирует размножение тех клонов, которые продуцируют ан-титела к его детерминантам.
Казалось бы, выход прост: надо вырастить от-дельные клоны антителообразующих клеток в про-бирке - в культуре тканей - и они будут продуциро-вать моноклональные антитела, то есть антитела одной строго определенной специфичности, про-дукт одного клона. Но и это оказалось невозмож-ным: нормальные клетки смертны, вскоре после высаживания в культуру они погибают. Дело не до-ходит до образования клонов АОК. Добавление в культуру факторов роста несколько продлевает их жизнь, но тоже не решает проблемы.
ДОРОГУ УКАЗЫВАЮТ ОПУХОЛИ
Путь решения проблемы неожиданно указали злокачественные опухоли. Уже давно известны опу-холи у человека -- плазмоцитомы, вырабатывающие и секретирующие в кровь иммуноглобулины, по структуре своей неотличимые от антител. Причем каждое такое "антитело" слегка отличалось от дру-гого, вырабатываемого другой плазмоцитомой. Об-разовывалась как бы коллекция случайных антител к неизвестным антигенам. Когда накопились сотни таких "антител" и они были испытаны с сотнями наугад взятых антигенов, оказалось, что в этой кол-лекции обнаружились специфически реагирующие пары "антиген--антитело".
Почему именно опухоли указали на возмож-ность получения моноклональных антител? Есть несколько причин, и все они коренятся в самой природе опухолевой клетки. Она всегда или почти всегда сохраняет свойства и функции клетки, из ко-торой произошла. Плазмоцитома происходит из "юных" плазматических клеток, то есть как раз из тех клеток, которые синтезируют антитела. Это свойство сохраняется в опухолях, возникших из со-ответствующих клеток. Очень важной особенностю опухолей является их возникновение из одной генетически измененной (мутантной) клетки. По-этому опухоль возникает и развивается как клон, в нашем случае как клон иммуноглобулинобразующих клеток. Причем они образуют строго однород-ный по всем свойствам моноклональный иммуноглобулин.
Нормальные плазматические клетки (или их предшественники - лимфоциты) смертны, их срок жизни - несколько дней. Опухоль, и в этом ее принципиальное отличие от нормальных предше-ственников, бессмертна. Ее можно культивировать в пробирке или пересаживать от одного животного другому неограниченное число раз и в течение нео-граниченного времени. В отличие от нормальной ткани опухоль автономна, организм "хозяина" не-способен (за очень редкими исключениями) оста-новить неограниченный рост злокачественного опухолевого клона.
Плазмоцитомы возникают не только спонтан-но, то есть непредсказуемо, как бы случайно, но их можно довольно легко индуцировать у мышей и крыс и получить, таким образом, бессмертный, не-ограниченно растущий, перевиваемый клон клеток, продуцирующих иммуноглобулины, иногда обла-дающие специфичностью антител, причем антител моноклональных. Вполне естественно было желание иммунологов научиться получать плазмоцитомы, продуцирующие антитела заданной специфичности. Для этого мышей вначале интенсивно иммунизиро-вали, а затем индуцировали у них плазмоцитомы, чтобы получить опухоли и из тех клонов, которые производили антитела к антигенам, использован-ным для иммунизации, но это практически не уда-валось. Слишком редки были совпадения. Тогда попробовали индуцировать опухоли антителообра-зующих клеток опухолеродными вирусами. Резуль-таты были лучше, однако создать простой и универ-сальный метод получения моноклональных антител на этом пути также не оказалось возможным.
КАК ЭТО БЫЛО СДЕЛАНО?
Успех пришел, как всегда, неожиданно, как по-бочный продукт исследования, имевшего иные цели. В начале 70-х годов молодой немецкий иммуно-лог Георг Кёлер, получивший стипендию для работы в знаменитом Базельском институте имму-нологии, заинтересовался вопросом о генетической изменчивости антител. В то время можно было ожидать, что антитела мутируют (генетически изме-няются) с большей частотой, чем другие белки. Для исследования надо было изолировать клон АОК, продуцирующий антитела определенной специ-фичности, получить из него стабильную клеточную линию, поддерживаемую в пробирке (в культуре), и проследить, с какой частотой появятся там генети-чески измененные варианты. Для реализации про-екта Кёлер поехал в Англию, в лабораторию Цезаря Мильштейна, изучавшего клоны плазмоиитом, и они вместе разработали оригинальный подход к этой проблеме: решили получить гибрид нормаль-ной АОК и опухолевой клетки. В случае успеха та-кой гибрид унаследовал бы от нормальной клетки способность к синтезу антител, а от опухолевой -- бессмертие и способность к неограниченному и бесконтрольному росту. Это им удалось осуществить?
ГИБРИДОМЫ
Методы гибридизации соматических (то есть не половых) клеток к тому времени были хорошо изве-стны и широко применялись для разных целей. Для этого использовали вирус, способствующий слия-нию клеток. Разнородные клетки, у которых сли-лись оболочки, образовывали двуядерные гибриды, которые сохраняли способность к клеточным деле-ниям. В процессе клеточного деления хромосомы обоих ядер перемешивались и образовывали общее ядро. Таким образом, возникал истинный гибрид, потомок двух соматических клеток, или гибридома. Гибридому можно получить и между нормальной АОК и опухолевой, плазмоцитомной клеткой. Плазмоцитома была взята потому, что она больше всего соответствовала АОК по типу дифференцировки. Весь ее синтетический аппарат был настроен на синтез иммуноглобулинов. Проблема заключа-лась в том, как отделить заданную гибридому от присутствующих в системе отдельных неслившихся клеток и от гибридов иного состава или иной спе-цифичности, чем требуемые.
Для достижения этой цели авторы разработали специальную схему, использующую отбор клеток в селектирующей среде. Прежде всего был получен особый мутант мышиной плазмоцитомы, рост ко-торого можно было контролировать составом питательной среды. Для получения мутанта использова-ли особенности синтеза нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), имеющихся во всех клетках и необходимых для их существования. Известно, что имеются два пути синтеза предшественников нуклеиновых кис-лот: основной и резервный. Основной -- это путь новообразования нуклеотидов, звеньев, входящих в состав нуклеиновых кислот. Этот путь включает не-сколько этапов и блокируется противоопухолевым препаратом аминоптерином (А). Однако клетки не гибнут от этого препарата, поскольку обладают ре-зервным путем -- способностью синтезировать нук-леотиды и нуклеиновые кислоты, реутилизируя продукты распада ранее синтезированных нуклеи-новых кислот: гипоксантина (Г) и тимидина (Т). Добавление Г и Т в питательную среду, содержащую А, снимает токсический эффект последнего.
Для селекции гибридом надо было получить мутант плазмоцитомы, не с и т.д.................


Перейти к полному тексту работы



Смотреть похожие работы


* Примечание. Уникальность работы указана на дату публикации, текущее значение может отличаться от указанного.