На бирже курсовых и дипломных проектов можно найти образцы готовых работ или получить помощь в написании уникальных курсовых работ, дипломов, лабораторных работ, контрольных работ, диссертаций, рефератов. Так же вы мажете самостоятельно повысить уникальность своей работы для прохождения проверки на плагиат всего за несколько минут.

ЛИЧНЫЙ КАБИНЕТ 

 

Здравствуйте гость!

 

Логин:

Пароль:

 

Запомнить

 

 

Забыли пароль? Регистрация

Повышение уникальности

Предлагаем нашим посетителям воспользоваться бесплатным программным обеспечением «StudentHelp», которое позволит вам всего за несколько минут, выполнить повышение уникальности любого файла в формате MS Word. После такого повышения уникальности, ваша работа легко пройдете проверку в системах антиплагиат вуз, antiplagiat.ru, etxt.ru или advego.ru. Программа «StudentHelp» работает по уникальной технологии и при повышении уникальности не вставляет в текст скрытых символов, и даже если препод скопирует текст в блокнот – не увидит ни каких отличий от текста в Word файле.

Результат поиска


Наименование:


курсовая работа Эпизоотологические особенности инфекционного ринотрахеита кошек в условиях города Благовещенска

Информация:

Тип работы: курсовая работа. Добавлен: 16.05.2012. Сдан: 2011. Страниц: 24. Уникальность по antiplagiat.ru: < 30%

Описание (план):


 
МИНИСТЕРСТВО  СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ  УЧРЕЖДЕНИЕ
ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ
«ДАЛЬНЕВОСТОЧНЫЙ  ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»
ИНСТИТУТ  ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ И ЗООТЕХНИИ 
 

Кафедра эпизоотологии, паразитологии
и микробиологии 
 

КУРСОВАЯ РАБОТА 

ПО КРАЕВОЙ  ЭПИЗООТОЛОГИИ   

на тему: «Эпизоотологические особенности инфекционного ринотрахеита кошек в условиях города Благовещенска»
                  
 

                              Выполнила:  студентка 5 курса,
                                                                              группы 2216/1
                                                                          Дёмина С.И.
                                                     Проверил:     Петрухин М. А.
                                
 
 
 
 
 

БЛАГОВЕЩЕНСК, 2011 

План курсовой работы
по «Краевой эпизоотологии»  

ВВЕДЕНИЕ                                                                                                       
1. Литературный обзор                                                                                    
1.1 Определение  болезни, историческая справка и краткая характеристика возбудителя                                                                                                       
1.2 Эпизоотологические  данные                                                                     
1.3 Патогенез и клинические признаки болезни                                           
1.4 Паталогоанатомические  изменения                                                          
1.5 Диагностика  и дифференциальная диагностика                                     
1.6 Иммунитет  и  средства специфической  профилактики                          
1.7Лечение и  меры борьбы с данной инфекцией.                                         
2. Собственные исследования                                                                      
2.1 Природно-климатическая  и хозяйственная характеристика  города Благовещенска                                                                                                  
2.2 Распространение  инфекционного ринотрахеита кошек                                                           
2.3 Экстенсивные  и интенсивные показатели эпизоотичского  процесса   
2.4 Экономическая  эффективность проведенных мероприятий                  
Заключение                                                                                                     
Список  использованной литературы                                                           
 
 
 
 

     Введение
     Актуальность  темы. Ринотрахеит кошек - широко распространенное инфекционное заболевание вирусной этиологии. Возбудитель болезни, FeHV-1, относится к подсемейству Alphaherpesvirinae, роду Varicellovirus, вызывает у взрослых животных преимущественно поражения органов респираторного тракта и глаз.
     Важным  биологическим свойством вируса является формирование состояния латенции, при котором переболевшие животные, остаются пожизненными вирусоносителями. При таком типе течения болезнь сопровождается периодическими рецидивами с выделением вируса во внешнюю среду. Однако у неимунных животных ринотрахеит протекает значительно тяжелее с вовлечением в инфекционный процесс до 100% животных.
     При энзоотическом течении, а также  при систематической профилактической вакцинации животных, болезнь проявляется в виде слабого респираторного синдрома, а также в виде субклинической или инаппарантной инфекции.
     Впервые болезнь описана в США как  «синдром поражения верхних дыхательных  путей» у котят. В России выделение вируса с установлением его этиологической роли было осуществлено Э.И. Элизбарашвили и соавт. (1995), затем в Сибири во время вспышки заболевания в питомнике домашних кошек.
     В последние годы возрос интерес к  разведению высокопородных, племенных  животных, сопровождающийся их постоянным экспортом и импортом, что значительно  усугубляет эпизоотическую ситуацию по инфекционным  болезням.
     Распространению возбудителя инфекции среди популяции  домашних кошек способствуют концентрация животных в питомниках по их разведению, перегруппировки, выставки, вязки и другие мероприятия, сопровождающиеся стрессами, при которых происходит реактивация вируса из латентного состояния, сопровождающаяся его репликацией и экскрецией во внешнюю среду с носовыми, глазными и вагинальными выделениями, а также слюной животных.
     При данной патологии большую роль играет специфическая профилактика, поскольку иммунизированные животные легче переносят инфекцию, однако она не предотвращает латентного состояния вируса.
     Количество  экспериментальных работ, посвященных  изучению клинико-эпизоотологических аспектов ринотрахеита кошек в различных климатогеографических регионах России, ограничено. Недостаточное внимание уделяется изучению роли вируса в патологии органов воспроизводства, а также — противовирусной активности различных препаратов.
     Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
     1. Изучить особенности эпизоотической ситуации и клинического проявления ринотрахеита кошек при групповом и индивидуальном содержании, а также - при острой и латентной (рецидивирующей) формах проявления инфекции.
     2. Определить роль вируса в патологии  органов воспроизводства кошек.
     Результаты  исследований представляют теоретическую  и практическую ценность, так как дают возможность расширить научные знания относительно роли вируса ринотрахеита кошек в возникновении массовых заболеваний у кошек, сопровождающихся поражениями органов респираторного тракта, глаз и органов воспроизводства. Они могут быть использованы при дальнейшем изучении эпизоотологии вирусных инфекций у кошек с целью совершенствования лечебно-профилактических мероприятий. 

    Литературный  обзор
     Ринотрахеит кошек широко распространен среди животных частных владельцев г. Благовещенска. Заболевание регистрировали у животных различных пород в возрасте от 1-3 мес. до 5 лет и старше, особенностей сезонного проявления инфекции не установили. Инфицированность животных выше при групповом содержании и в среднем составляла по результатам выделения вируса в культуре клеток — 55,73%, а по результатам полимеразной цепной реакции — 62,3%.
     Частота выявления вируса от клинически больных  животных, поступивших в ветеринарные учреждения в 2006 — 2010 гг., при помощи ПЦР составила 38,4%. Вирус выявляли в 23,8% случаев в моноварианте, в 7,4 -в ассоциации с вирусом калицивироза и хламидиями, в 4,4 - с вирусом калицивироза, а в 2,8% случаев — с хламидиями. У 48,6% животных регистрировали респираторную, у 42,2 - конъюнктивальную, у 6,4 - генитальную формы инфекции, у 2,8% - поражения слизистой ротовой полости и языка.
     Выявление вируса ринотрахеита кошек методом  ПЦР в пробах биоматериала от животных с поражениями органов воспроизводства, подтвержденное выделением вируса в культуре клеток и высоким уровнем сероконверсии к нему у переболевших животных, предполагает этиологическую роль вируса в данной патологии.
     С целью повышения эффективности  противоэпизоотических мероприятий при ринотрахеите кошек наряду с клиническим обследованием необходимо проводить лабораторные диагностические исследования биоматериала от животных с признаками респираторных и гинекологических болезней. Для первичного диагноза на ринотрахеит кошек эффективно использовать метод ПЦР, а для окончательного - вирусологические и серологические исследования. 
 
 

1.1 Определение болезни, историческая справка и краткая характеристика возбудителя.
       ЛЕЙКОЗ  – (BOVINE LYMPHOSARCOMA, LYMPHOCYTOMA, MALIGNANT LYMPHOMA, LYMPHOBLASTOMA, LEUKOSIS ENZOOTICA BOVIS LEUKOSIS, LEUKEMIA, PSEUDOLEUKEMIA, LIMPHADENOSIS, ЛЕЙКЕМИЯ, БЕЛОКРОВИЕ, Leucosis bovis).
       Лейкоз  крупного рогатого скота (лимфосаркома, лимфоцитома, злокачественная лимфома, лейкобластома, энзоотический лейкоз, лейкемия, псевдолейкемия, лимфаденоз) – хроническое неопластическое заболевание, которое характеризуется злокачественной пролиферацией лимфоидных клеток, прогрессирующим истощением животных и высокой летальностью. Диффузные или узелковые новообразования серые по цвету, мягкие по консистенции и, как правило, мультицентрические по происхождению. Поскольку это заболевание имеет спорадическое распространение и поражает взрослых животных, для мясного скотоводства и особенно для скотооткормочной промышленности США лейкоз не имеет большого значения. Несмотря на то, что частота проявления заболевания в репродукторных стадах может быть значительной, лейкоз возникает лишь на отдельных откормочных площадках. Наносимый при этом экономический ущерб обусловлен истощением и падежом больных животных.
       Хроническая злокачественная вирусная болезнь, характеризующаяся неопластической  пролиферацией кроветворной и лимфоидной ткани, развитием патологических очагов кроветворения (мегаплазией) и нарушением процесса созревания кровяных клеток (анаплазией), смертельным исходом. Проявляется в виде инфекционного энзоотического лейкоза крупного рогатого скота (ЭЛ КРС) и спорадического лейкоза молодняка (СЛМ).
       Историческая справка.
       Первые  случаи лейкозов были описаны в Германии: у человека (Р. Вирхов, 1845), лошадей и свиней (А. Лейзеринг, 1858) и крупного рогатого скота (О. Сидамгродский, 1878). К настоящему времени их диагностируют как у теплокровных, так и холоднокровных животных. В разные годы эту болезнь именовали белокровием, лейкемией, раком крови, лейкозом и др. В последнее время, по международной терминологии, ее называют лейкозом, так как основные изменения (патогенетическая сущность) происходят в различных органах и не всегда в периферической крови.
       Большой вклад в изучение лейкозов внесли отечественные исследователи А. Томаров (1862), К. Славянский и А. Щастнов (1867-1876), впервые указавшие на патоморфологическое и биологическое сходство лейкозного и опухолевого процессов. М. А. Новинский (1846-1914) считается основоположником экспериментальной онкологии. Вирусогенетическая теория происхождения злокачественных опухолей Л. А. Зильбера в настоящее время доминирует; она подтверждается результатами исследования данной болезни. Патоморфологически Л КРС объединяет опухолевые болезни кроветворных органов, а также лимфоидный, миелоидный и слабо дифференцированные (гемоцитобластоз) лейкозы, лимфосаркому, ретикулосаркому, лимфог-рануломатоз (Л. Г. Бурба).
       Причина лейкоза крупного рогатого скота до конца не выяснена. Однако многие факты позволяют предполагать, что по крайней мере одним из этиологических факторов является вирусоподобный возбудитель. Вирусную гипотезу возникновения лейкоза подтверждают как клинические, так и лабораторные данные. Непрерывность жизнедеятельности вируса поддерживается путем вертикальной передачи, сохраняя болезнь внутри линий и семейств крупного рогатого скота в течение длительного периода времени. При этом в неблагополучных стадах периодически возникают случаи лейкоза, в то время как генетически родственные линии остаются свободными от заболевания.
       Лейкоз  зачастую распространяется в стаде  после завоза животных, которые, возможно, являются носителями возбудителя. В лаборатории из лейкозного материала были выделены вирусоподобные частицы и выращены в культуре ткани селезенки эмбриона крупного рогатого скота. Вирусоподобные частицы были также обнаружены в отцентрифугированных образцах молока коров. Под электронным микроскопом вирусоподобные частицы были обнаружены в биопсированных тканях, инфицированных клеточных культурах и отцентрифугированном молоке. Вирусоподобные частицы в молоке имели диаметр 60-110 нм.
       Возбудитель. РНК-содержащий онкогенный вирус, относящийся к роду Oncovirus типа С семейства Retroviridae. Диаметр вирионов около 100 нм. Вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛ КРС) или бычий лейкозный вирус (БЛВ) морфологически сходен с возбудителями лейкоза у животных других видов. Малоустойчив к дезинфицирующим средствам (1-я группа).
       Устойчивость ВЛ КРС во внешней среде небольшая. В клеточных культурах при нагревании до 60 С он погибает через 1 мин, быстро обезвреживается 2-3 %-ными растворами едкого натра, формальдегида и другими дезинфицирующими средствами в общепринятых концентрациях. Инакгивируется ВЛ КРС в молоке нагреванием его до 74 °С в течение 17 с или скисанием (рН 4,75). Вирус может длительное время находиться в клетке в частично или полностью связанном состоянии с ее геномом. Патогенное действие он проявляет при снижении иммунологической реактивности организма животных. 
 

       1.2 Эпизоотологические данные.
       ЭЛ  КРС диагностируют на всех континентах мира. В 1986 г. из европейских стран были свободными от ЭЛ КРС лишь Исландия, Мальта, Нидерланды и Швейцария. Обычно ВЛ КРС передается конгенитально (через плаценту) или горизонтально.
       Конгенитальное  заражение вирусом телят в  хозяйствах происходит сравнительно редко. Телята заражаются главным образом постнатально, в первую очередь с молозивом и молоком. От животных возбудитель передается путем прямого или косвенного контакта: с молоком, слюной, кровью (независимо от того, содержит ли кровь лейкоциты или нет). Возбудитель болезни разносится быстро, если не соблюдаются правила асептики и антисептики при манипуляциях у животных (взятие крови, прививки и др.). Горизонтальная передача ВЛ КРС имеет большое значение внутри стада; при этом особую роль играют кровососущие насекомые.
       Как правило, болезнь встречается у  высокопродуктивного скота (лучший генетический фонд молочного скота), в частности, при несбалансированном кормлении, когда молочная железа израсходует  вещества, не компенсируемые кормами, и ослабляются физиологические функции организма. Между хозяйствами, районами, областями, странами ЭЛ КРС распространяется в основном при транспортировке племенных животных, зараженных ВЛ КРС.
       Существенное  значение в распространении болезни  имеет гено- и фенотипическая предрасположенность животных к лейкозу, например, среди красного и черно-пестрого пород скота. Напряженность эпизоотологического процесса связана с породой крупного рогатого скота и составляет 3-20% и более, а летальность – до 15%.
       Поражает крупный рогатый скот всех возрастов; наиболее часто в возрасте 6-24 месяцев. Развитие болезни обусловливают генетическая предрасположенность к лейкозу и иммунная недостаточность организма животного. Источник инфекции – зараженное животное. Наиболее вероятный способ передачи возбудителя – с инфицированными лимфоцитами. Возможен пренатальный (от матери плоду), постнатальный (при совместном содержании инфицированных и свободных от ВЛКРС животных) и комбинированный пути передачи вируса. Основной фактор распространения лейкоза – завоз молодняка из неблагополучных хозяйств.
1.3 Патогенез и клинические признаки болезни
       Патогенез. Поскольку возбудитель лейкоза крупного рогатого скота неизвестен, механизм развития патогенеза изучен не полностью. Предполагается, что сложный этиологический фактор, включающий вирус, передается от матери восприимчивому плоду во внутриутробный период жизни или же теленку с молозивом и молоком. В период длительной предопухолевои стадии этиологический фактор воздействует на лимфоидную ткань и стимулирует процесс злокачественного разрастания ткани в одной или нескольких анатомических точках. При первичной пролиферации лимфоидной ткани происходит окклюзия (закупорка) синусов, центры размножения лимфоузлов разрушаются и заменяются малодифференцированными неопластическими лимфоцитами и лимфо-бластами. Пораженные лимфоузлы увеличиваются в размерах.
       В начальных стадиях болезни неопластические  клетки обнаруживаются только в паренхиме  лимфоузла, но постепенно эти клетки наводняют капсулу и инфильтрируют окружающие ткани. Обычно неопластические клетки метастазируют в другие органы. Чаще поражаются миокард, костный мозг, стенка сычуга, почки, глазной жир, органы тазовой полости, эпидуральная ткань спинного мозга. Менее восприимчивы мышцы, кожа, печень, нервы и другие органы. Метастатический рост обусловливает повышение давления и гибель клеток, следствием чего является частичное или полное нарушение функций органов. Злокачественный рост может быть очаговым или диффузным. В крови лимфоцитоз бывает переходящим или постоянным, умеренным или острым. Иногда в тяжелых стадиях некоторые периферические лимфоузлы могут быть сильно увеличены.
       Вирусоподобный возбудитель передается от больных коров плоду. Передача может произойти во внутриутробный период или же с молоком после рождения. Этим объясняется наличие пораженных лейкозом семейств коров. При продаже животных-носителей вируса из таких семейств болезнь распространяется на другие стада.
       Какова  бы ни была этиологическая природа  лейкоза (вирусная или же обусловленная другими неизвестными факторами), возбудитель в пораженных стадах сохраняется десятилетиями. Завезенные в такие стада восприимчивые животные могут заболеть лейкозом. Перемещения животных из пораженных в свободные от заболевания стада могут стать причиной распространения лейкоза. При этом с момента завоза новых животных до появления первых случаев лейкоза в свободных прежде от заболевания стадах может пройти 4 года.
       Клинические признаки. После периода медленного скрытого развития лейкоз крупного рогатого скота проявляется в самых разнообразных формах. Несмотря на наличие достаточного количества корма и воды, скорость роста животных замедляется и они постепенно истощаются. Температура тела, как правило, нормальная, но может периодически повышаться. С помощью пальпации снаружи и ректально можно установить одностороннее или двустороннее увеличение некоторых лимфоузлов. Околоушные, предлостаточные лимфоузлы и лимфоузлы коленной складки часто увеличены и легко перемещаются при пальпации. Одностороннее увеличение предлопаточного узла может быть причиной сгиба шеи в противоположную сторону, а при увеличении заглазничных лимфоузлов наблюдается экзофтальмия. В некоторых случаях вследствие нарушения функции спинного мозга в начальном периоде болезни наступает паралич тазовых конечностей.
       Проявление  других клинических признаков при  лейкозе зависит от степени пораженности тех или иных органов. Инфильтрация и разрушение костного мозга приводит к нормоцитарной анемии с несколько пониженным уровнем гемоглобина и побледнением видимых слизистых оболочек. При исследовании мазков крови выявляется лимфоцитоз, зачастую постоянный. Число лейкоцитов колеблется от нормы и до 300 тыс. в 1 мм3 крови при высоком процентном содержании лимфоцитов. Поражение миокарда приводит к тахикардии, неясным сердечным шумам и физической слабости. Сдавливание отдельных участков сердца или полой вены может вызвать генерализованный пассивный застой крови и обширные отеки. Инфильтрация стенки сычуга редко вызывает закупорку просвета, но может привести к образованию язв и кровотечений в просвет органа. Инфильтративное разрастание злокачественной опухоли в эпидуральном пространстве, сдавливание спинного мозга и инфильтрация спинных ганглиев и спинномозговых нервов являются причиной нарушения координации движений и параличей, в частности тазовых конечностей.
       Биохимическими  исследованиями сыворотки крови  можно установить повышение уровня аспартат-аминотрансферазы и лактат-дегидрогеназы.
       Хотя  спорадические случаи лейкоза могут  возникать в любом стаде, частота  заболевания внутри стада низка.
       Инкубационный период ЭЛ КРС (до появления изменений  в периферической крови) при экспериментальном  заражении – 60-750 дней, при спонтанном – 2-6 лет. В течении лейкоза выделяют предлейкозную, начальную, развернутую и терминальную стадии болезни, которые следуют одна за другой и являются обычно преходящими. Предлейкозную стадию выявляют серологическими и вирусологическими исследованиями, при этом никаких гематологических изменений нет. При начальной стадии лейкоза отмечают количественные и качественные сдвиги в составе клеток крови: увеличивается число лейкоцитов, повышается процент лимфоцитов, появляются малодифференцированные, незрелые, разной величины, патологические формы клеток. Развернутая стадия характеризуется кроме гематологических сдвигов клиническими признаками: ухудшается общее состояние, снижаются удои, наблюдается истощение, ослабление работы сердца, часто обнаруживают увеличение лимфоузлов (они безболезненны, подвижны, эластичны), внутренние лимфоузлы поражаются чаще поверхностных. При терминальной стадии инфекции болезнь развивается быстро, отмечается истощение кроветворных органов, сопровождающееся блокадой иммунной системы и гибелью животного. У молодняка (4-12 мес) ЭЛ КРС встречается в 3 формах: мультицентрической (лимфосаркома), тимусной (опухолевидное разрастание в нижней части шеи) и кожной (кожный лейкоз), протекающей с развитием инфильтра-тивных разрастаний в коже.
       Развернутая стадия характеризуется, кроме гематологических сдвигов, разнообразием неспецифических и специфических клинических признаков, их проявление зависит от локализации патологического процесса. Неспецифические признаки – это ухудшение общего состояния животного, плохое усвоение кормов, снижение удоя, быстрая утомляемость, прогрессирующее исхудание, расстройства пищеварения (диарея, запоры, атония или тимпания преджелудков), ослабление сердечной деятельности, цианоз и желтушность слизистых оболочек, нарушение дыхания, отеки в области подгрудка, живота, вымени, хромота на одну или обе задние конечности, затруднение выделения мочи, аборты, яловость, увеличение одной или нескольких долей вымени.
       Специфическими  признаками лейкоза считаются увеличение поверхностных (предлопаточных, околоушных, надколенных, подчелюстных, надвымянных) и внутренних (доступных ректальному исследованию) лимфатических узлов; появление опухолевых разрастаний в различных областях тела, экзофтальм, увеличение селезенки и печени. Лимфоузлы имеют величину от грецкого ореха до детской головы. Они безболезненны, подвижны, эластичной или плотной консистенции, а при сильном растяжении капсулы становятся болезненными. Внутренние лимфоузлы поражаются чаще поверхностных.
       При теpминaльной стадии быстро развивается патологический процесс. Отчетливо проявляются неспецифические признаки. Количество лейкоцитов в периферической крови иногда снижается, при этом преобладают их патологические формы. Рерко изменяется качественный состав лимфоцитов в сторону их патологии. Уменьшение количества лейкоцитов объясняется истощением кроветворной ткани и понижением физиологической реактивности организма. Лейкозные изменения обнаруживаются в селезенке, сердце, печени, почках, сычуге. Данная стадия развивается при понижении резистентности организма животного и заканчивается острым течением смертельно, нередко от разрыва селезенки или других внутренних органов.
       У молодняка, преимущественно в возрасте 4-12 мес, болезнь встречается в трех формах: мультицентрической (лимфосаркома, общая лимфаденопатия), тимусной (опухолевидное разрастание в нижней части шеи) и кожной (кожный лейкоз), протекающей с развитием инфильтративных разрастаний в коже.
1.4 Патологоанатомические изменения.
       Выявляются  истощение и анемия. Лимфоузлы  обычно увеличены в 5 или более  раз. Сильно увеличены подчелюстные, затем в порядке убывания предлопаточные, коленной складки, надвыменные и поясничные лимфоузлы. Капсула лимфоузла упругая, равномерно серая, при разрезе мягкая ткань выходит на поверхность. В случае инфильтрации капсулы лейкозом поражаются окружающие ткани, которые имеют спайки с лимфоузлами. Чаще всего инфильтрируются сердце, сычуг и спинной мозг. Миокард, который обычно поражается в области правого предсердия, правого желудочка и перегородки, утолщен и имеет бледную окраску. Вследствие расстройства кровообращения возникает генерализованный застой крови и отек. Узлы неопластической ткани в эпидуральном пространстве спинного мозга приводят к увеличению местного давления, деформации и атрофии спинного мозга. Стенка сычуга зачастую утолщена и твердая вследствие неопластической инфильтрации. Лейкоз поражает также почки, печень, нервные стволы и другие органы, редко – мозг.
       Гистологически  новообразование состоит из нежной стромы и клеток двух типов: лимфоцитов диаметром 8-10 мкм с ядром в центре и комками хроматина и лимфобластов диаметром 12-15 мкм с одним и чаще более ядрышками в ядре. Митоз – общее явление. Во всех пораженных органах вследствие бурного роста неоплатических клеток здоровые, нормальные клетки органов вытесняются и погибают.
       При вскрытии трупа в зависимости  от формы и стадии течения лейкоза обнаруживают значительные изменения (в виде диффузной или очаговой инфильтрации) в органах кроветворения, пищеварения, на серозных покровах, в сердце, печени, почках и в матке.
       Основными формами ЭЛ КРС считаются собственно лейкозы и ретикулозы. К собственно лейкозам относят лимфо- и миелолейкоз, гемобластоз, а к ретикулозам – лимфо- и ретикулосаркому, системный ретикулоз, лимфогрануломатоз и плазмоцитому. Эта классификация ЭЛ КРС основана на патоморфологической характеристике разрастаний (новообразований), результатов цитологического и гематологического исследований циркулирующих в крови клеточных элементов (степени их созревания). Для патогистологического исследования направляют от павших или убитых животных кусочки (2x2 см) измененных органов, фиксированных 10 %-ным раствором формалина. При ЭЛ КРС наблюдают в органах характерные изменения, в первую очередь – лимфоидно-клеточную инфильтрацию.
1.5 Диагностика и дифференциальная диагностика
       Диагноз. ЭЛ КРС диагностируют на основании  эпизоотологического, клинйкогематологического, серологического, вирусологического, патологоанатомического исследований с обязательным проведением гистологического исследования.
       При гематологическом исследовании на Л  КРС используют различные критерии, названные «лейкозными ключами». Определяют отклонение от нормы число лейкоцитов, молодых клеток, абсолютное и процентное количества лимфоцитов. Однако по мере развития патологического процесса число лейкоцитов и лимфоцитов у животных иногда даже может быть ниже нормы. Кроме того, в 8-40% случаев ЭЛ КРС может протекать алейкемически (число лейкоцитов 5,5-9,5 тыс/мкл). Все животные, у которых установлен персистентный (длительный) лимфоцитоз (ПЛЦ), являются носителями ВЛ КРС, но не у всех инфицированных вирусом животных развивается ПЛЦ. Процент случаев ЭЛ КРС (инфекции ВЛ КРС) без ПЛЦ бывает в пределах 15-72%. Поэтому с помощью лейкозного ключа выявляют не всех больных ЭЛ КРС, а только животных с гематологическими изменениями.
       Для выделения вирусов животных используют иммунологические методы исследования: в геле (РИД), метод иммунофлюоресценции (РИФ), РСК, радиоиммуьологический и др. Они позволяют выявить распространение ВЛ КРС в стадах и способствуют ранней диагностике болезни. Из этих методов по простоте постановки реакции более широкое практическое применение нашла РИД, основанная на обнаружении в сыворотке крови специфических антител к глюкопротеидному и полипептидному антигенам ВЛ КРС
       Животные  реагируют серологически положительно через 2-4 мес после инфицирования ВЛ КРС. Антитела выделяются молозивом и молоком, и их можно установить у телят до 6-месячного возраста. Поэтому диагностическое значение у молодняка имеют антитела, обнаруживаемые с 6-месячного возраста. Вспомогательными методами диагностики ЭЛ КРС считаются исследования пунктата грудной кости, лимфоузлов, биопсия печени и селезенки.
       Дифференциальный  диагноз Необходимо исключить СЛМ и болезни, сопровождающиеся сходными с ЭЛ КРС изменениями в составе крови. СЛМ отличается от ЭЛ КРС по этиологии. Возбудителем СЛМ не является ВЛ КРС. При СЛМ не образуются антитела против ВЛ КРС, не возникает ПЛЦ, отмечается спорадическое распространение, острое или подострое течение и заболевание молодняка.
       Необходимо  учитывать, что многие остро и  хронически протекающие болезни (туберкулез, бруцеллез, паратуберкулез, антиномикоз, некоторые инвазионные болезни, травматический перикардит, ретикулит, метриты, маститы, гепатиты и др.) нередко сопровождаются значительными изменениями крови, которые имеют защитный характер и определяются как лейкемоидная реакция организма (ЛР), отражающая функционально-реактивные изменения.
       Изменения крови при лейкозе носят органический характер. ЛР является временной, исчезает она с улучшением состояния животного. Для исключения указанных болезней проводят соответствующие микробиологические, серологические, аллергические, гистологические, копрологические, повторные гематологические и другие исследования.
       СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ  МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ
       1. Сущность метода – выявление при помощи РИД в сыворотке крови животных специфических преципити-рующих антител к ВЛКРС.
       Пробы крови для исследований берут  не ранее чем через 15 суток после  введения животным вакцин или аллергенов, за 30 суток до отела и спустя такой же срок после него.
       Специфические антитела появляются в крови через 1-2 мес после заражения вирусом лейкоза и сохраняются пожизненно.
       Серологическому исследованию на лейкоз подвергают сыворотки  крови от животных в возрасте 6 мес. и старше.
    Для постановки РИД используют диагностический набор, который состоит из специфического антигена вируса лейкоза крупного рогатого скота, специфической преципитирующей сыворотки к вирусу лейкоза крупного рогатого скота, отрицательной сыворотки и других компонентов. К набору прилагается наставление по его применению для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
    Испытуемые сыворотки получают из крови исследуемого животного в количестве 2-3 мл и направляют в лабораторию с сопроводительным документом, в котором указывают название хозяйства, номер  (кличку), возраст, пол, породу животного.
       Кровь (для получения сыворотки) берут  в бактериологические пробирки, выдерживают 1-2 ч в теплом месте (не выше 40 °С). Для лучшего отделения сыворотки образовавшийся сгусток обводят в пробирке, профломбированной после каждой пробы стальной спицей (проволокой). После этого пробирки выдерживают в течение 20-24 ч при 4-10°С. Полученные пробы сыворотки сливают в пробирки Флоринского (достаточно по 2-3 мл) и маркируют.
       При невозможности быстрого исследования подготовленные пробы сыворотки  можно хранить в замороженном состоянии или консервировать борной кислотой (2-4 % к объему, до образования на дне пробирки осадка кристаллов).
       2.4. Оборудование и реактивы. Для постановки РИД требуются:
      чашки Петри или стеклянные пластины размером 6x9 или 9x12 см;
      стандартный штамп-пробойник для просечения лунок в агаре;
      пастеровские пипетки;
      потенциометр (рН-метр);
      осветитель;
      агар Дифко (или агар-порошок, ГОСТ 17006 – 84);
      буфер 0,05 М Трис-НС1, рН 7,2;
      хлорид натрия (х.ч.);
      дистиллированная вода;
      соляная кислота (концентрированная, х.ч.).
       2.5. Постановка РИД.
       2.5.1. Компоненты реакции и подготовка их к работе. Лиофилизированный антиген, специфическую преципитирующую и отрицательную сыворотки растворяют дистиллированной водой в объеме, указанном на этикетке. Растворенные диагностикумы можно хранить при температуре 4°С не более двух недель.
       Расплавленный агаровый гель, имеющий температуру 50-65°С, разливают слоем 2-3 мм в обезжиренные чашки Петри или на стекла, установленные в горизонтальном положении, и оставляют их при комнатной температуре на 1 ч.
        В затвердевшем агаре с помощью штампа-пробойника прорезают лунки для тест-систем – для каждой тест-системы требуется семь лунок диаметром 5-7 мм: одна в центре и шесть по периферии, расстояние между лунками соответственно 2,5-3 мм (рис. 2).
       2.5.2. Лиофилизированный антиген, контрольные и испытуемые сыворотки вносят в лунки пастеровскими пипетками, которые для каждого диагностикума должны быть отдельные. Пипетки для испытуемых сывороток промывают после каждой пробы. Лунки заполняют доверху, не допуская переливания жидкости через край.
       Антиген вносят в центральную лунку, две  диаметрально противоположные лунки  заполняют специфической.
       После заполнения лунок чашки Петри выдерживают 48 ч при температуре 18-27°С (стеклянные пластинки – при той же температуре во влажной камере) (рис. 4).
       2.6. Учет и оценка результатов реакции.
    Реакцию учитывают через 48 ч в проходящем свете и оценивают при наличии четкой контрольной линии преципитации между антигеном и специфической преципитирующей сывороткой и отсутствии таковой с отрицательной контрольной сывороткой (рис. 5).
    При оценке результатов реакции с испытуемыми сыворотками прежде всего устанавливают специфичность образовавшихся линий преципитации.
       Специфической считают линию преципитации, которая  образуется между лунками с испытуемой сывороткой и антигеном и соединяется с контрольной линией преципитации, то есть идентична ей (рис. 6).
       Неспецифической считают линию преципитации, которая образуется между лунками с испытуемой сывороткой и антигеном, но не сливается с контрольной линией преципитации, а пересекает ее или упирается в нее, образуя угол.
        2.6.3. В зависимости от наличия специфических антител против ВЛКРС и типа получившихся линий преципитации реакцию  оценивают как положительную или отрицательную.
       2.7. Реакцию считают положительной, если между лунками с испытуемой сывороткой и антигеном:
      образуется линия преципитации, которая соединяется с контрольной линией и идентична ей (см. рис. 6);
      линия преципитации отсутствует, но контрольная полоса образует изгиб вблизи лунки с испытуемой сывороткой к лунке с антигеном;
      кроме специфической линии преципитации, образуется дополнительная линия, которая располагается ближе к лунке с испытуемой сывороткой и обусловлена наличием антител к полипептидному антигену р24 ВЛКРС (см. рис. 6).
       2.8. Реакцию считают отрицательной, если контрольная линия преципитации продолжается до лунки с испытуемой сывороткой без изгибов.
       2.9. При наличии слабо различимого изгиба линии преципитации у лунки с испытуемой сывороткой животное исследуют вновь через три-четыре недели.
       В случаях, когда линия преципитации плохо просматривается или имеется  зона опалесценции вокруг лунок, реакцию  следует переставить.
       При сдвиге контрольной линии преципитации в сторону лунок с антигеном  необходимо провести проверку компонентов  реакции на активность в контрольной  тест-системе.
       2.10. Животных, сыворотки к рови которых дали положительный результат в РИД, считают зараженными вирусом лейкоза, и их необходимо исследовать гематологическим методом.
       3. ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ
       Метод заключается в количественной и  качественной оценке лейкоцитов периферической крови животных, отнесенных по результатам  РИД к группе инфицированных ВЛКРС.
       При гематологическом исследовании осуществляют:
      подсчет количества лейкоцитов при помощи электронного счетчика частиц или в камере Горяева;
      дифференцированный подсчет лейкоцитов в мазках (выведение лейкоформулы) или лимфоцитов при помощи фазово-контрастного микроскопирования крови в камере Горяева;
      оценку количества лейкоцитов и абсолютного количества лимфоцитов по "лейкозному ключу" (постановку гематологического диагноза).
       3.1. Для количественной и качественной оценки лейкоцитов берут пробы крови в пробирки с антикоагулянтом. В качестве антикоагулянта используют трилон-Б (ЭДТА – динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) из расчета одна капля 10%-ного раствора (на дистиллированной воде) на 1 мл крови. Можно использовать гепарин из расчета 5 БД на 1 мл крови или 6%-ный раствор лимоннокислого натрия (одна капля на 1 мл крови).
       Для предотвращения свертывания крови  пробирки сразу же (не отходя от исследуемого животного) закрывают резиновой  пробкой и тщательно перемешивают, переводя попеременно пробирку из вертикального  положения в горизонтальное.
       Пробы крови должны быть исследованы не позднее 36 ч с момента взятия.
       3.2. Определение количества лейкоцитов.
       3.2.1. Подсчет количества лейкоцитов  при помощи электронного счетчика  частиц гипа"Целлоскоп", "Культер", "Пикоскел" выполняют в соответствии  с наставлением (инструкцией) по их эксплуатации.
       Для проведения исследования готовят следующие  растворы:
      раствор электролита – в 10 л дистиллированной воды растворяют 90 г хлористого натрия (х.ч.), 5 г трилона-Б, 10 мл 40 %-ного нейтрального формалина. Фильтруют его через 5-6 слоев фильтровальной бумаги. Индикаторной бумагой контролируют рН раствора, путем добавления трис-буфера доводят его до 6,0-7,2 (включая случаи, когда рН ниже 6,0);
      для лизиса эритроцитов используют 1 %-ный водный раствор сапонина, смешивая его в соотношении 1000:5 с 35 %-ным раствором формальдегида. Сразу после приготовления раствор фильтруют, разливают в небольшие флакончики и хранят в замороженном виде. Срок хранения до 3 мес.
      При работе со счетчиками французского производства "Культер-Каунтер" готовят только один раствор, добавляя на 10 л раствора электролита 2 г белого сапонина.
       3.2.2. Подсчет лейкоцитов в камере  Горяева. В пробирки Флоринского  или в лунки полистироловых  пластин разливают по 0,4 мл жидкости Тюрка. Состав жидкости Тюрка следующий: ледяная уксусная кислота 1-3 мл, 1 %-ный водный раствор метиленового синего или генци-анвиолета, дистиллированная вода до 100 мл.
       Стеклянным  капилляром набирают предварительно перемешанную кровь до метки 0,02 мл (20 мм3). Марлевой салфеткой протирают наружную поверхность капилляра от крови и плавно выдувают содержимое на дно пробирки (лунки) с жидкостью Тюрка. Несколько раз капилляр промывают, насасывая и выдувая содержимое пробирки (лунки).
       Для следующего этапа работы готовят  камеры Горяева, притирают к ним (со стороны сетки) шлифованные стекла (из комплекта камеры Горяева). Можно с успехом использовать шлифованные кварцевые стекла размером 26x24x3 мм из комплекта стандартных кювет, прилагаемого к фотоэлектроколориметрам отечественного про изводства.
       В подготовленную для работы камеру Горяева  при помощи глазной пипетки вносят разведенные в жидкости Тюрка (предварительно пропипетировав) пробы крови от двух животных. Для удобства учета проб в верхнюю половину вносят нечетные, а в нижнюю – четные пробы. Если в камере будут обнаружены пузырьки воздуха, то ее перезаряжают вновь. Выждав 1-2 мин, пока клетки осядут, их подсчитывают под микроскопом при увеличении 10x10 или 10x20. Клетки подсчитывают в 25 больших квадратах (разделенных на 16 малых), начиная с левого верхнего угла сетки и далее сверху вниз (итого в пяти вертикальных рядах – по пять квадратов в ряду). В каждом квадрате считают клетки, находящиеся внутри, а также лежащие на левых и нижних линиях и в левых углах квадрата.
       Для подсчета содержания лейкоцитов в 1 мкл крови число подсчитанных в 25 квадратах клеток умножают на 200.
       При достаточном навыке врач-гематолог  может определять пробы заведомо нормальной крови, исходя из общей картины  распределения клеток в поле зрения микроскопа, оцененной визуально (без поклеточного подсчета) при однократном и достаточно быстром перемещении в вертикальном направлении всей сетки камеры Горяева. В этом случае в ведомости вместо количества лейкоцитов ставится индекс "N" (норма).
       Пробы, вызвавшие даже самое малое подозрение на лейкоцитоз, подлежат подсчету в 25 квадратах камеры, как указано выше.
       3.3. Дифференцированный подсчет лейкоцитов (выведение лейкоцитарной формулы)  проводят при обнаружении повышенного  количества их. Для этих целей  готовят мазки крови.
       3.3.1. Мазки крови (приготовление и фиксирование).
       3.3.1.1. Подготовка предметных стекол. Для  приготовления мазков крови используют чистые обезжиренные предметные стекла без царапин и шероховатостей. Новые стекла моют в теплой мыльной воде, затем в проточной, протирают тампоном, смоченным смесью спирта и эфира, а затем сухой салфеткой.
       Со  стекол, бывших в употреблении, удаляют  иммерсионное масло тампоном, смоченным  ксилолом или бензином, после чего их помещают на один-три дня в раствор двухромовой смеси (100 г двухромовокислого калия растворяют в 1 л горячей воды и постепенно приливают 100 мл концентрированной серной кислоты). Стекла промывают в проточной воде 1-2 сут, протирают сухой хлопчатобумажной тканью и заливают на 1-2 сут смесью спирта и эфира в равных частях. Затем стекла вновь насухо протирают чистой салфеткой и по 10-15 штук обертывают бумагой.
       3.3.1.2. Мазки готовят из стабилизированной  крови на обезжиренных предметных  стеклах. Для предотвращения возможного  травмирования клеток крови при  производстве мазков, особенно в холодное время года, рекомендуется предметные стекла слегка подогреть (до температуры тела).
       Для приготовления мазка стекло берут  в левую руку между большим  и указательным пальцами за короткие грани. Каплю крови наносят на правый конец стекла. Она должна быть такого размера, чтобы конец мазка, приготовленного из него, не доходил на 1 см до края стекла. Шлифованное стекло ставят впереди капли крови, надвигают до прикосновения с ней и равномерным движением влево делают мазок.
       Хорошо  приготовленный мазок должен быть тонким, ровным и при просмотре на свет отливать цветами радуги.
       После высушивания на воздухе мазки  маркируют простым карандашом или  иглой, указывая номер экспертизы, инвентарный  номер или кличку животного, дату приготовления мазка, и фиксируют в метиловом спирте 3-5 мин, этиловом спирте – 20-30, жидкости Никифорова (смесь равных частей этилового спирта и эфира) – 15-20 или ацетоне – 5 мин.
       3.3.2. Окраска мазков крови. Окраска  по Романовскому-Гимза. Окрашивают мазки в течение 20-30 мин краской Романовского – Гимзе в специальных ваннах (можно в чашках Петри). Затем краску многократно смывают дистиллированной водой и мазки высушивают на воздухе. Качество окраски контролируют под микроскопом. В правильно окрашенном мазке ядра клеток приобретают красно-фиолетовый цвет, цитоплазма лимфоцитов – голубой, а цитоплазма ней-трофилов – розовый.
       На  рис. 7 показаны лимфоидные клетки коровы при лимфолейкозе (окраска по Романовскому – Гимза).
       Окраска по Паппенгейму. Для ее проведения применяют две краски. Вначале нефиксированный мазок обрабатывают краской Май-Грюнвальда в течение 3 мин, а затем к красящему объему добавляют равное количество дистиллированной воды и в одерживают 2-3 мин, после чего мазок промывают и докрашивают по Романовскому – Гимза при экспозиции 10-15 мин. В препаратах крови, окрашенных этим методом, цветовые оттенки ядер и цитоплазмы, характерные для отдельных видов клеток, получаются отчетливее, чем при окраске по Романовскому – Гимзе.
       Окраска по Нохту. Предварительно готовят 0,1 %-ный водный раствор основной краски азур II и 0,1 %-ный раствор кислой краски желтого эозина и выдерживают их в течение двух недель. Перед окраской готовят свежий рабочий раствор, состоящий из двух частей раствора эозина, трех – раствора азура II и пяти частей дистиллированной воды. Красят мазки 20-25 мин. Цитоплазма окрашивается в светло-желтый цвет, ядро – в фиолетовый.
       3.3.3. Лейкоцитарную формулу выводят по результатам дифференцированного подсчета 100 клеток в окрашенных мазках крови под микроскопом с иммерсионной системой. При подсчете предметное стекло продвигают по зигзагообразной линии в направлении к концу мазка. Для счета дифференцированных клеток используют клавишный счетчик. Количество отдельных элементов крови в лейкоцитарной формуле выражают в процентах.
       3.3.4. Для подсчета абсолютного количества лимфоцитов, в пробе крови относительное их содержание (в %), определяемое по лейкоцитарной формуле, умножают на показатель абсолютного количества лейкоцитов в 1 мкл и полученное произведение делят на 100. Показатель абсолютного количества лимфоцитов оценивают затем по "лейкозному ключу", указанному в таблице.
       3.3.5, Дифференцированный подсчет количества  лейкоцитов можно производить  с помощью фазово-контрастного  микроскопирования крови в камере  Горяева. Для этого пробы с повышенным содержанием лейкоцитов микроскопируют с использованием фазово-контрастного устройства (отечественные марки КФ-4, КФ-5) при увеличении объектива 20х или 40х.
       3.3.5.1. Состав фазово-контрастного устройства. Основные части устройства – фазовые объективы и фазовый конденсор.
       Объективы для наблюдения методом фазового контраста отличаются от обычных  ахроматических только тем, что в  плоскости выходного зрачка объектива  нанесено фазовое кольцо, а на корпусе  выгравирована буква "Ф".
       Фазовый конденсор отличается от обычного наличием кольцевых диафрагм, помещенных в фокальной плоскости конденсора; диафрагмы вставляются в револьверный диск и применяются в соответствии с выбранным объективом. Конденсор может быть использован для наблюдения обычным способом; для этого в диске револьвера, кроме кольцевых диафрагм, имеется свободное отверстие для пропускания всего пучка света.
       Фазовый конденсор вставляется в кольцо кронштейна конденсоров микроскопа и зажимается винтом обычным способом.
       Кольцевые диафрагмы, в зависимости от применяемого объектива, сменяют поворотом револьверного диска за накатанную часть до фиксации, причем в окне кожуха конденсора должна появиться цифра, соответствующая увеличению применяемого объектива, или буква "О", соответствующая свободному отверстию.
       Два винта служат для центрировки  кольцевой диафрагмы относительно фазового кольца объектива.
       Вспомогательный микроскоп (МИР-4) применяют при центрировке  изображения кольцевой диафрагмы  конденсора относительно фазового кольца объектива. Вспомогательный микроскоп вставляют в тубус микроскопа вместо окуляра и после выполнения центрировки снова заменяют окуляром.
       3.3.5.2. Порядок работы. Вставить в револьвер  микроскопа фазово-контрастные объективы.
       Установить  в кольцо кронштейна конденсоров фазовый конденсор; при этом в окне кожуха конденсора должна быть буква "О".
       Поместить на предметный столик препарат  (заряженную камеру Горяева) и сфокусировать  микроскоп на сетку камеры.
       Настроить осветитель по правилам нормального  освещения.
       Открыть полностью ирисовую диафрагму конденсора.
       Вставить  вместо окуляра вспомогательный  микроскоп и, перемещая его окуляр боковым винтом, сфокусировать на фазовое кольцо объектива.
       Включить  вращением револьверного диска  конденсора требуемую кольцевую  диафрагму; при этом в окне кожуха конденсора должна появиться цифра, соответствующая увеличению выбранного объектива, а во вспомогательном микроскопе, помимо фазового кольца, видно светлое кольцо диафрагмы.
       Совместить  с помощью центрировочных винтов светлое кольцо с темным кольцом. Если светлое кольцо остается шире темного, передвижкой конденсора по высоте следует добиться, чтобы оно полностью вписывалось в темное кольцо.
       Снять вспомогательный микроскоп и  заменить его обычным окуляром.
       Для достижения большей контрастности рекомендуется пользоваться цветным светофильтром. После смены объектива необходимо заново проверить центрировку изображения кольцевой диафрагмы относительно фазового кольца.
       Фазово-контрастное  микроскопирование проб крови при  увеличении объектива 20х или 40х позволяет достаточно надежно дифференцировать лимфоциты от остальных лейкоцитов (рис. 8).
       Фазово-контрастное  микроскопирование проб крови в  камере Горяева позволяет достаточно надежно дифференцировать лимфоциты  от остальных лейкоцитов. Ядра лимфоцитов правильной округлой формы, неблестящие, структура хроматина вы глядит мелкосетчатой, более плотная к центру. Ядра нейтрофйлов – неправильной формы, блестящие. Другие лейкоциты (эозинофилы, моноциты и пр.) также достаточно четко отличаются от лимфоцитов.
       Производят  дифференцированный подсчет лимфоцитов и отдельно – всех остальных лейкоцитов в 25 больших квадратах камеры Горяева. При этом можно пользоваться клавишным счетчиком лейкоцитов: на каждую пробу отводят по две клавиши (одну для лимфоцитов, другую для всех остальных клеток – нелимфоцитов). Общее число клеток (лимфоциты+нелимфоциты), а также число только лимфоцитов, подсчитанных в 25 квадратах, умножают на 200 и получают соответственно показатель абсолютного содержания лейкоцитов и лимфоцитов в 1 мкл крови. Эти значения затем оценивают по "лейкозному ключу" (см. таблицу в п. 3.3.4)
       Иногда  могут возникнуть затруднения в дифференцированном подсчете лимфоцитов (что случается достаточно редко и, как правило, связано со значительным омоложением клеток лимфоидного ряда). По морфологии большая часть таких клеток значительно отличается от лимфоцитов и нейтрофилов. Ядра полиморфные, в той или иной степени увеличенные, но неблестящие. Хроматин выглядит грубодисперсным. В таких случаях подсчитывают общее количество лейкоцитов и готовят мазки крови, по которым выводят лейкоцитарную формулу по методике, описанной в подпункте 3.3.3.
       Животных  относят к категории больных  по результатам однократного гематологического  исследования.
       Животных, подозреваемых в заболевании лейкозом, подвергают через 1-2 мес дополнительному гематологическому исследованию. При повторном подтверждении диагноза их считают больными.
       4. КЛИНИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА
    Клинические признаки лейкоза чаще проявляются у животных в возрасте 4-7 лет и обусловлены той или иной локализацией опухолевого процесса и вызванным им нарушением функции соответствующего органа. Чаще отмечают нарушения репродуктивной и пищеварительной функций (нарушение половых циклов, гипотония преджелудков), ослабление деятельности сердечно-сосудистой системы (отеки в области шеи, подгрудка, подчелюстного пространства, живота).
    При пальпации иногда обнаруживается увеличение лимфатических узлов – подчелюстных, околоушных, поверхностных шейных, надвымянных, коленной складки. Иногда в области шеи или голодных ямок могут быть увеличены подкожные лимфатические узлы.
       При ректальном исследовании самок на стельность следует обращать внимание на возможное  увеличение тазовых лимфатических  узлов, утолщение стенок матки.
       Последнее имеет место при вовлечении органа в лейкозный процесс. Иногда отмечают экзофтальмию (пучеглазие) – одно или двустороннюю.
    Болезнь протекает волнообразно (циклически):
фазы  обострения сменяются частичными клинико-гематологическими  ремиссиями различной длительности. Смена этих фаз может сопровождаться кратковременными (от нескольких часов до двух-трех суток) кризисными явлениями, клинически отмечающимися потерей тактильной чувствительности, отказом от корма, обильной саливацией, диареей (иногда с примесью крови), судорожными явлениями, жвачкой без пищевого кома, понижением температуры тела на 1-2°С. По прошествии кризисного  периода в  случае  благоприятного исхода состояние животного полностью нормализуется. Кризис, возникший на фоне значительного омоложения лимфоидных клеток периферической крови, завершается смертью животного.
    В последний период жизни у коров, больных лейкозом, резко снижается молокоотдача, часто, но не всегда, наблюдается прогрессирующее исхудание, локальное (на голове и холке) выпадение шерстного покрова.
    Следует клинически дифференцировать лейкоз от болезней нелейкозной природы, сопровождающихся сходными синдромами.
       5. ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ
       5.1. Патологоанатомическое исследование. При вскрытии трупов или послеубойном  осмотре туш и органов животных обращают внимание на величину органов, распространенность опухолевых разрастаний, их связь с лимфатическими узлами или другими органами и тканями.
       Все формы лейкоза характеризуются  увеличением в различной степени  лимфатических узлов. При системных  лейкозах (кроме злокачественного гистиоцитоза) они увеличены равномерно, не сращены с окружающими тканями, капсула снимается легко; на разрезе серо-белого, цвета, сочные, саловидные.
       При опухолевых лейкозах, а также при  злокачественном гистиоцитозе лимфатические узлы бугристые, капсула сращена с паренхимой; на разрезе часто обнаруживают кровоизлияния и некрозы. В органах брюшной, тазовой полостей, на серозных оболочках отмечают диффузные или узловые опухолевые разрастания различной величины и формы. В терминальной стадии возможно развитие больших опухолевых конгломератов серо-белого, серо-желтого цвета с очагами кровоизлияний и некроза.
       Селезенка увеличена при всех случаях системного лейкоза и в 40-60 % случаев лимфогранулематоза. Значительное увеличение селезенки наблюдается при лимфоид-ном и миелоидном лейкозах. В начальной стадии структура органа сохранена, фолликулы гиперплазированы. В более поздней стадии границы между красной и белой пульпой стерты, ткань мягкой консистенции, от буро-красного до буро-коричневого цвета. При миелоидном лейкозе селезенка красно-малинового цвета, фолликулы плохо заметны, ткань рыхлой консистенции, с кровоизлияниями. В терминальной стадии может происходить разрыв селезенки.
       При всех фермах лейкоза отмечают очаговые или диффузные разрастания серо-белого или серо-розового цвета в печени, почках, в сердечной мышце, органах пищеварения, матке, скелетной мускулатуре и других органах.
       5.2. Гистологическое исследование.
       5.2.1. Правила взятия и пересылки  патологического материала для  гистологического исследования. Материал берут не позднее 12 ч после убоя или смерти животного. Исследованию на лейкоз в первую очередь подлежат лимфатические узлы из разных частей тела, селезенки, костного мозга (грудной кости), а затем уже остальные измененные и макроскопически не измененные органы и ткани. Вырезают кусочки размером не более 2x1,5 см, фиксируют 10 %-ным водным раствором нейтрального формалина или 96°-ным этиловым спиртом. Для нейтрализации формалина используют порошок углекислого кальция (мел). Применяемый для фиксации раствор готовят из коммерческого формалина, представляющего собой 35-40 %-ный водный раствор формальдегида, путем смешивания 1 части его с 9 частями водопроводной воды. Материал помещают в стеклянную банку вместе с этикеткой из плотной бумаги, на которой графитным карандашом указывают дату и номер животного. Если необходимо зафиксировать материал от нескольких животных, используют марлевые мешочки отдельно для каждого из них.
       Фиксирующей жидкости по объему должно быть в 10 раз  больше объема патологического материала. Фиксирующую жидкость через сутки заменяют свежей до получения прозрачного состояния. Однажды использованную фиксирующую жидкость повторно не применяют.
       Оформляют сопроводительные документы с обязательным указанием возраста, инвентарного номера (клички), породы животного, результатов серологического, гематологического, клинического и патологоанатомического исследований.
       5.2.2. Наиболее распространенные формы  заболевания у крупного рогатого  скота – лимфоидный лейкоз и лим-фосаркома; реже встречается лимфогранулематоз и очень редко остальные формы болезни.
       При лимфоидном лейкозе в селезенке  и лимфатических узлах наблюдают  стирание рисунка за счет диффузной  пролиферации лимфоидных клеток (в  селезенке со стороны фолликулов, в лимфатических узлах со стороны фолликулов и мозговых тяжей) различной степени дифференциации. В зависимости от преобладания в клеточном субстрате зрелых лимфоцитов, пролимфоцитов или лимфобластов определяют различные варианты лимфоидного лейкоза. В костном мозге строма сохранена, может происходить истончение и рассасывание балок. Скопления лимфоцитов располагаются диффузно или в виде очагов, заполняя все костномозговые пространства. В печени, почках, сердце, органах пищеварения и других органах отмечают инфильтрацию лимфоидными клетками интерстициальной ткани.
       При миелоидном лейкозе в селезенке (красной пульпе) обнаруживают клетки гранулоцитарного ряда, в том числе  промиелоциты и миелобласты, а также очаги эритро-мегакариопоэза. В лимфатических узлах, печени, почках, легких и других органах наблюдают очаговые или диффузные разрастания миеловидных элементов.
       При злокачественном гистиоцитозе размножение опухолевых клеток (гистиоцитов, ретикулярных клеток, макрофагов) происходит в лимфатических узлах в перифолликулярных участках, в синусах и перитрабекулярных зонах; в селезенке – в красной пульпе. В других органах и тканях опухолевые разрастания имеют связь с элементами ретикулогистиоцитарной системы.
       При лимфосаркоме в селезенке и костном  мозге изменений опухолевого типа не обнаруживают. В лимфатических узлах наблюдают диффузную или очаговую пролиферацию лимфоидных клеток. По аналогии с лимфоидным лейкозом различают лимфоцитарный, пролимфоцитарный, лимфобластный, лимфоплазмоцитарный варианты в зависимости от преобладания тех или иных клеточных форм в опухолевой ткани.
       Сравнительно  редко, но выделяют и нодулярный вариант  лимфосаркомы – макрофолликулярный. Микроскопически в лимфатических узлах отмечают множество различных по величине и форме фолликулов, занимающих все поле зрения светового микроскопа. Фолликулы состоят в основном как бы из одних центров размножения, окруженных узким ободком лимфоидных клеток.
       При лимфогранулематозе выявляют изменения  опухолевого и воспалительного  характера. В лимфатических узлах  и селезенке наблюдают размножение лимфоидных клеток, нейтрофильных и эозинофильных лейкоцитов, гистиоцитов, плазматических клеток и единичных фибробластов. Могут появляться склеротические изменения. В опухолевом субстрате постоянно присутствуют клетки Березовского – Штернберга.
       При ретикулосаркоме в лимфатических  узлах отмечают размножение атипичных  ретикулярных клеток, среди которых  выявляют одно-, двух- и многоядерные формы. Обнаруживают макрофаги и гистиоциты. В костном мозге и селезенке изменений опухолевого характера не наблюдают.
       6. ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
       6.1. Животное считают больным лейкозом при наличии 
одного из следующих показателей:

      положительного результата однократного гематологического исследования;
      клинических признаков болезни;
      характерных патологоанатомических изменений;
      положительного результата гистологического исследования патологического материала.
       6.2. Животных, положительно реагирующих по РИД, но не имеющих клинико-гематологических изменений, характерных для лейкоза, относят к группе повышенного риска заболевания лейкозом. Таких животных учитывают при проведении противолейкозных мероприятий, но в отчет по форме 1-вет. не включают.
       7. СРОКИ ИССЛЕДОВАНИЙ
       Серологическое  исследование проводят в течение  четырех дней, на гематологическое затрачивают столько же времени, а гистологическое длится 20 дней.
1.6 Иммунитет и средства специфической профилактики
       B организме животных, зараженных  ВЛ КРС, выявляют преципитирующие  и комплементсвязывающие антитела. Вопросы иммунитета и иммунизации  при ЭЛ КРС еще мало изучены. Однако обнадеживающими являются работы по специфической иммунопрофилактике с использованием вирусспецифических препаратов ВЛ КРС. У нас разработан способ получения вакцины против ЭЛ КРС. В первых опытах по иммунизации телят и овец отмечено прогрессирующее антителообразование как к гликопротеидному, так и к обоим антигенам ВЛ КРС.
       1.7 Лечение и меры борьбы с данной инфекцией
       Лечение. Не разработано.
       Меры борьбы. В благополучных хозяйствах. Регулярно проводить клинический осмотр поголовья скота. Подозреваемых в заболевании лейкозом животных дополнительно исследуют серологическим и гематологическим методами и при установлении у них изменений в крови, свойственных лейкозу, подвергают комиссионному диагностическому убою с обязательным гистологическим исследованием патматериала.
       Коров, быков-производителей обязательно  исследуют один раз в год серологическим (РИД) методом. В случае выявления  реагирующих животных их дополнительно  исследуют гематологическим методом  и при наличии лимфоцитоза, характерного для лейкоза, проводят диагностический убой с обязательным гистологическим  исследованием.
       Молодняк  исследуют по РИД в 6 месяцев и перед осеменением, а продаваемый – за один месяц до вывоза из хозяйства. В случае выявления реагирующих животных их переводят в группу откорма с последующей сдачей на мясо.
       На  станциях искусственного осеменения и  племпредприятиях. Все быки два раза в год подвергаются клиническому и серологическому исследованию в РИД. В случае выявления реагирующих  животных они подлежат сдаче на мясокомбинат. Остальное поголовье исследуют серологическим методом ежеквартально до получения двух подряд отрицательных результатов.
       Запасы  спермы, полученные от инфицированных быков за два месяца до выявления  у них антител к ВЛК.РС, подлежат уничтожению.
       Комплектование  племпредприятий проводят животными, свободными от антител к ВЛКРС. Всех поступивших быков в период карантина  обязательно исследуют на лейкоз серологически.
       В товарных хозяйствах и комплексах. Обязательному серологическому исследованию на лейкоз подвергают молодняк, достигший 6-месячного возраста, телок в 12 месяцев и перед случкой. Для воспроизводства стада отбирают только серонегативных животных, реагирующих переводят в группы откорма с последующей сдачей на убой.
       Коров исследуют серологическим методом только при выявлении в хозяйстве у убитых или погибших животных патологоанатомических изменений, характерных для лейкоза. При выявлении серопозитивных животных Их обязательнв исследуют гематологическим методом и при установлении лимфоцитоза подвергают диагностическому убою и гистоисследованию патматериала. При подтверждении диагноза хозяйство объявляют неблагополучным и проводят мероприятия по ликвидации заболевания.
       Мероприятия в неблагоприятных пунктах по лейкозу крупного рогатого скота. При инфицировании ВЛКРС до 30% коров в стаде поступают следующим образом. Нереагируютцих по РИД коров исследуют серологическим методом два раза в год, серопозитивных дополнительно дважды исследуют гематологическим методом с интервалом в 2 месяца. При установлении в крови изменений, характерных для больных, или подозрительных в заболевании животных в течение 15 дней сдают на убой. Допускается разделение стад на серопозитивную и серонегативную группы, если район благополучен по туберкулезу и бруцеллезу.
       При выявлении в стаде более 30% инфицированных вирусом лейкоза коров серологические исследования прекращают. Ежеквартально  проводят клинический осмотр коров на лейкоз, выявленных в течение 15 дней сдают на убой. Два раза в год исследуют гематологически, при выявлении у животных лимфоцитоза их переисследуют через 2 месяца и при положительном результате в течение 15 дней сдают на убой.
       Не  подлежат серологическому и гематологическому  исследованиям животные в течение 30 дней после вакцинации или введения аллергенов, а также за 30 дней до и после отела.
       Молодняк  исследуют на лейкоз серологическим методом в возрасте 6 месяцев, 12 месяцев, перед осеменением и после  первого отела. Реагирующих переводят  в группу откорма с последующей  сдачей на мясо. Нереагирующих выращивают изолированно, формируют в отдельные гурты и размещают в обособленном помещении. Ввод их в гурты коров запрещается.
       Молодняк  к продаже для племенных и  производственных целей допускается  только после исследования серологическим методом с отрицательными результатами не менее двух раз в возрасте 6 месяцев и за месяц до реализации.
       Коровы, признанные больными лейкозом, подлежат немедленной изоляции и убою. Туши с поражениями лимфатических узлов и скелетной мускулатуры утилизируются. При отсутствии поражений и при отрицательных результатах бактериологии на наличие сальмонелл мясо и внутренние органы подвергают термической обработке. Молоко от остальных коров сдают на молоко завод на обычных основаниях, где оно подвергается пастеризации в обычном технологическом режиме.
и т.д.................


Перейти к полному тексту работы


Скачать работу с онлайн повышением уникальности до 90% по antiplagiat.ru, etxt.ru или advego.ru


Смотреть полный текст работы бесплатно


Смотреть похожие работы


* Примечание. Уникальность работы указана на дату публикации, текущее значение может отличаться от указанного.