На бирже курсовых и дипломных проектов можно найти образцы готовых работ или получить помощь в написании уникальных курсовых работ, дипломов, лабораторных работ, контрольных работ, диссертаций, рефератов. Так же вы мажете самостоятельно повысить уникальность своей работы для прохождения проверки на плагиат всего за несколько минут.

ЛИЧНЫЙ КАБИНЕТ 

 

Здравствуйте гость!

 

Логин:

Пароль:

 

Запомнить

 

 

Забыли пароль? Регистрация

Повышение уникальности

Предлагаем нашим посетителям воспользоваться бесплатным программным обеспечением «StudentHelp», которое позволит вам всего за несколько минут, выполнить повышение уникальности любого файла в формате MS Word. После такого повышения уникальности, ваша работа легко пройдете проверку в системах антиплагиат вуз, antiplagiat.ru, etxt.ru или advego.ru. Программа «StudentHelp» работает по уникальной технологии и при повышении уникальности не вставляет в текст скрытых символов, и даже если препод скопирует текст в блокнот – не увидит ни каких отличий от текста в Word файле.

Результат поиска


Наименование:


реферат Криоконсервация. Банки гибридом. Применение моноклональных антител

Информация:

Тип работы: реферат. Добавлен: 20.05.2012. Сдан: 2011. Страниц: 6. Уникальность по antiplagiat.ru: < 30%

Описание (план):


ОМСКАЯ  ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ
Кафедра промышленной технологии с курсом биотехнологии 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Реферат на тему:
«Криоконсервация. Банки гибридом. Применение моноклональных антител». 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

                Выполнила: студентка 577гр. Фармацевтического факультета Лупенко А. П. 
                 
                 
                 
                 
                 
                 
                 
                 
                 

Омск, 2008 г.
Содержание:
    Введение.
    Криоконсервация
          Что такое криоконсервация
          История
          Применяемые методы
          Применяемое оборудование
    Банки гибридом
      Что такое гибридомы
      Создание гибридом
      Институт цитологии российской академии наук
    Применение моноклональных антител
      Что такое моноклональные антитела
      Метод получения
      Применение
   5. Заключение 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

    1.Введение
    Люди  давным-давно отметили, что любые  продукты питания растительного  и животного происхождения значительно лучше сохраняются в охлаждённом и замороженном состоянии, при этом исключается их гниение, заражение плесневыми грибами и т.п. Но при этом люди замечали, что слишком долго хранить продукты охлаждёнными либо замороженными тоже нельзя – они теряют влагу, полезные вещества постепенно разлагаются, а после разморозки так и вообще теряют структуру. Последнее обусловлено образованием кристалликов льда в клетках (как животных, так и растительных), которые, увеличиваясь в объёме и имея острые грани, разрывают клеточные мембраны, нарушая клеточную структуру тканей.
    В медицине к середине ХХ-го века накопилось достаточно проблем, решение которых  заключалось бы в долгом сохранении нативных качеств клеток и тканей in vitro. Мысли учёных обратились к методам заморозки. Но попытки замораживания культур клеток и тканей долгое время оставались безуспешными по той же причине образования кристалликов льда внутри клеток.
    Решение однако всё же было найдено –  в методах криоконсервации, обеспечивших значительный прогресс биотехнологии, производства лекарственных препаратов и медицины. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

    2.Криоконсервация.
    2.1.Что  такое криоконсервация.
    Криоконсервация - процесс хранения органов, тканей или отдельных клеток при пониженной температуре.
    Наилучшие условия для криоконсервации создаются при температуре жидкого азота, минус 196 градусов Цельсия. Криоконсервация позволяет создать клеточный "банк запасных частей", необходимых для восстановления жизненных функций организма, нарушенных в результате заболевания или в процессе его лечения. Криоконсервации могут быть подвергнуты и стволовые клетки пуповинной крови, полученные при рождении человека. В этих условиях стволовые клетки могут храниться десятилетиями. В последующие годы они могут быть извлечены из криогенного хранилища, разморожены и использованы для новых способов лечения заболеваний.
    2.1.История.
    В большей степени учёных интересовало сохранение половых клеток животных и человека – для селекции пород  животных и для лечения бесплодия  человека.
    Отдельные попытки сохранения в замороженном состоянии яйцеклеток и сперматозоидов животных предпринимались еще 200 лет назад. Но только с 1949 года, когда Польдж с коллегами открыли защитные свойства глицерина, криоконсервация спермы стала реальностью.  Яйцеклетки, эмбрионы и ткань яичников сохранить длительное время не удавалось. Лишь с введением других реагентов (ДМСО и пропандиол), гораздо позже, наконец удалось удачно провести замораживание и размораживание сначала эмбрионов (Вайтенгем в 1972 году), а затем и зрелых ооцитов (Фрайдлер в 1988 году) млекопитающих. Первая беременность из замороженного и размороженного эмбриона человека была получена в 1983 году (Троунсон и Мор). К 2000 году наиболее распространенным подходом к криоконсервации эмбрионов оказался метод замораживания эмбриона на стадии зиготы. В этом случае выживаемость эмбрионов имеет наиболее высокие показатели и достигает 60-80%. Частота имплантации эмбрионов достигает тех же значений, что и у свежих эмбрионов - 10-15%. Во многих странах используется также криоконсервация эмбрионов на стадии дробления. В зависимости от качества эмбрионов после оттаивания в этом случае выживают около 30-80 % эмбрионов.
    Криоконсервация неоплодотворенных зрелых ооцитов  и яичниковой ткани человека,  тем не менее, до настоящего времени остается еще мало решенной проблемой.   Сложность криоконсервации зрелых ооцитов связана с тем, что при замораживании на этой стадии часто повреждаются веретена мейотического деления, что ведет к анеуплоидии.  Частота наступления беременности после криоконсервации ооцитов человека составляет всего 1% и таким образом, не достаточна для клинического применения. Лишь в 2000 году впервые было сообщено об успешной криоконсервации ткани яичника человека. По данным авторов, фолликулы нормально развивались в кусочках яичниковой ткани, которая была взята, заморожена и подсажена у одной и той же пациентки.
    2.3.Применяемые  методы.
    Суть  всех методов сводится к решению  главной проблемы – избежание  образования кристалликов льда внутри клеток. Главная задача, которую нужно решить при замораживании, заключается, поэтому,  в обезвоживании клетки. Однако, удаление слишком большого количества воды также губительно для нее.   Точка замораживания воды, содержащей различные ионы, находится ниже 0°C и зависит от концентрации растворенных веществ. При замораживании клетки часть молекул воды в ней начинает кристаллизоваться, и это еще больше повышает концентрацию раствора, что в свою очередь снижает точку замораживания.   Возрастание осмотического давления является также губительным для клетки. В настоящее время общепризнанно, что повреждение клетки происходит не из-за низкой температуры как таковой, а из-за образования кристалликов льда в определенных температурных зонах при замораживании и оттаивании.
    В том случае, если производится медленное замораживание клеток, их содержимое  может сохраниться в жидком состоянии при  температуре значительно более низкой, чем   точка замерзания соответствующего раствора.  Этот феномен известен под названием - супер-охлаждение. Солевой раствор на фосфатном буфере с добавлением ДМСО имеет точку замерзания -3°C. При медленном замораживании такой раствор можно охладить до состояния супер-охлаждения при температуре -21°C без образования льда. Замораживание обычно производят в специальных программируемых аппаратах, которые точно поддерживают скорость охлаждения и нужные температурные режимы. Этот метод называется методом контролируемой заморозки и оттаивания эмбрионов. С целью предотвращения спонтанного образования льда, он включает в себя очень важный этап, который называется сидинг. Под сидингом подразумевают индукцию образования кристалликов льда при температуре несколько меньшей точки замораживания, что также предотвращает сверх-охлаждение.    Сидинг обычно выполняется при температурах -5  - 7°C вручную путем прикосновения пинцетом или другим предметом к соломинке содержащей раствор с клетками.
    Температура при которой заканчивается медленное  замораживание и материал переносится  в жидкий азот  влияет на степень  дегидратации клеток. Так, клетки, охлажденные медленно до температуры - 60°C имеют высокую степень дегидратации и требуют медленного оттаивания (8 - 20°C/минуту) с целью обеспечения адекватной регидратации. Наоборот, клетки, охлажденные медленно только до  -30  - 40°C должны оттаивать быстро (275 - 500°C/минуту). При оттаивании клеток фактически решают две задачи - это регидратация клетки и удаление криопротектанта, находящегося в клетке. Чтобы избежать осмотического шока от быстрой регидратации, размораживаемый эмбрион помещается поэтапно в несколько растворов содержащих все более низкие концентрации криопротектанта.
    Очень низкий процент успеха достигаемый  при замораживании зрелых ооцитов  стимулировал поиск совершенно новых  подходов. Большие надежды возлагаются  на разрабатываемый в настоящее  время метод ультрабыстрого замораживания. Пробные исследования составов реагентов и условий ультрабыстрой криоконсервации начались еще с середины 80-х годов. На сегодня  этот подход получил  значительное развитие и возможно в ближайшие годы он будет приобретать все большее значение в репродуктивных технологиях. При ультрабыстрой криоконсервации происходит витрификация цитоплазмы, что означает замораживание без образования кристалликов льда.
    Витрифика?ция (стеклование)(от лат. Vitrum — стекло и лат. facio — делаю, превращаю, то же что стеклование) – это переход жидкости при понижении температуры в стеклообразное состояние.
    Для витрификации необходимо избежать образование  кристаллической фазы при охлаждении. Практически любой расплав можно  витрифицировать, т.е. перевести в стеклообразное состояние. Некоторые расплавы (такие как стеклообразующих веществ) не требуют для этого быстрого охлаждения. Напротив, расплавы металлов требуют для витрификации (получения металлических стекол) чрезвычайно быстрое охлаждение. В биотехнологии витрификация может наступать в живых организмах при медленном охлаждении, с восстановлением жизнедеятельности при обратном нагреве.
    Метод требует высоких концентраций хорошо проникающего сквозь мембрану криоконсерванта  в сочетании с малопроникающими растворами для дегидратации клеток.  Витрификация заключается в помещении клеток на короткое время (чтобы избежать токсического действия)  в витрификационную среду с последующим замораживанием с очень высокой скоростью. Витрификационные среды обычно содержат высокие концентрации этилен гликоля (40%), фикола (18%) и сахарозы (10%) или только этиленгликоля и сахарозы.  Первые сообщения об успешном применении метода для замораживания ооцитов  с последующим рождением  детей уже появились начиная с  1999 года. 
    Недавно японскими исследователями во главе с доктором Masashige Kuwayama был изобретён новый метод криоконсервации Cryotop. Новая методика позволяет замораживать овоцит в крошечном количестве специального раствора очень быстро, с последующим хранением в жидком азоте, что предотвращает формирование ледяных кристаллов, которые могут повредить структуру яйцеклетки. Если ранее процент выживания эмбрионов и овоцитов после разморозки составлял лишь около 50%, то новый метод позволил увеличить это значение до 94,5%. Число беременностей после оплодотворения в пробирке составило 41.9 %, и оказалось сопоставимо с 42.5 %, при использовании овоцитов без заморозки.
    Но  в рамках всей биотехнологии криоконсервации  подвергаются не только клетки тканей человека, но всевозможные штаммы бактерий и грибов, культуры растительных и животных клеток – всё то, что может послужить основой для восстановления редких видов растений и животных, селекции новых пород, сортов и штаммов, производства различных лекарственных, в т.ч. иммунологических, препаратов.
    Методы  криоконсервации:
    Криоконсервация в глицерине при - 196 Со с высокой скоростью охлаждения.
    Криоконсервация в сахарозе при - 196 Со с высокой скоростью охлаждения.
    Криоконсервация в сахарозо-желатиновом агаре при - 196 Со с высокой скоростью охлаждения.
    Криоконсервация на дисках плотной среды в глицерине при - 196 Со с высокой скоростью охлаждения.
    Криоконсервация при - 196 Со с медленной скоростью охлаждения.
    Криоконсервация при -196 Со со средней скоростью охлаждения.
    Криоконсервация на силикагеле.
    Криоконсервация при -70 Со.
    Криоконсервация при -70 Со на фильтровальной бумаге.
    Криоконсервация при температурах от -10 до -18 Со в пробирках.
    Криоконсервация с помощью сухого льда (СО2).
    Выбор метода для культуры клеток диктуется свойствами самой культуры клеток. Последний метод отличается простотой исполнения и оборудования, но применяется в основном для криоконсервации спермы.
    2.4.Применяемое  оборудование.
    Культуры  клеток непосредственно замораживаются и хранятся в пробирках или в соломинках (чаще) из полимерных материалов: полипропилена, силикона и др. На пробирку или соломинку обязательно наносится маркировка краской, устойчивой к большим температурным перепадам.
    Соломинки и пробирки в свою очередь помещаются в специальные кассеты в горизонтальном положении, кассеты загружаются в охладители или аппаратуру для хранения с постоянно поддерживаемой темепратурой. При криоконсервации до -196 град С используется среда хранения – жидкий азот. Замороженные культуры клеток можно извлекать из среды хранения без вреда лишь на очень ограниченное время – не более 1-2 мин. При постоянно поддерживаемой температуре хранения культуры клеток могут храниться десятки лет (например, сперма – 10 лет).
    Оборудование:
    Программные охладители - замораживатель программный KRYO 360-1.7, KRYO 560-16 (последние цифры обозначают объём рабочей части), система криоконсервации Kryosave Intregra полнофункциональная 30 л (фирма «PLANER»), CL2200 SYS, CL3300 (фирма «CRYOLOGIC»), КОП-6  и др. (используются для витрификации);
    Насосы для жидкого азота - насос для жидкого азота активный для лабораторного дьюара 30 л и др.;
    Дополнительные принадлежности для замораживателей различных объёмов – холдеры на 3-5 соломин объёмом 0,25-0,5 мл, микроаспираторы для соломин, вакуумный мининасос для заполнения соломин, сменные наконечники (фирма «CryoBioSystem»);
    Оборудование медицинское для хранения крови, клеток и тканей в жидком азоте – марок V-1500B, S-1500B, S-3000B, V-3000B, V-5000BEH  фирмы «Дельрус»;
    Дьюары – сосуды для хранения и транспортировки жидкого азота, марок: дьюар лабораторный MVLAB30, дьюар низкого давления, 230 л.   
    3.Банки  гибридом.
    3.1.Что  такое гибридомы.
    Гибридома (от гибрид и греч. -oma - опухоль) - клеточный гибрид, получаемый слиянием нормальной клетки (например, иммунного лимфоцита) с опухолевой. Обладает способностью к синтезу специфического белка, например, антитела (свойство нормальной клетки), и к неограниченному росту (свойство опухолевой клетки). Синтезируемые гибридомой моноклональные антитела применяют во многих областях биологии и медицины. Ведутся работы по получению гибридом, продуцирующих другие белки - факторы свертывания крови, гормоны и т. п.
    Гибридомы сыграли и продолжают играть огромную роль в фундаментальной и прикладной иммунологии. Они созданы на основе клонально-селекционной теории иммунитета и явились самым ярким и окончательным доказательством этой теории. Гибридомы сделали реальностью предполагаемые клоны антителообразующих клеток и позволили даже обнаружить их существование в организме до введения соответствующего антигена. Гибридомы революционизировали иммунологическую промышленность и создали в ней совершенно новые области. Благодаря гибридомам возникли новые методы диагностики многих заболеваний и открылись новые пути для изучения злокачественных опухолей.
    Хотя гибридомы скорее относятся к гениальным изобретениям, а не к открытиям, они были отмечены в 1984 году Нобелевской премией, высшей научной наградой, присуждаемой за выдающиеся открытия. 
Если бы Кёлер и Мильштейн запатентовали свой метод, они вскоре бы стали миллиардерами, так как все, кто использовал бы гибридомы в коммерческих целях, должны были бы платить за право пользоваться патентом. Авторы гибридом, несомненно, понимали это, но в интересах развития науки не пошли на такой шаг. Метод гибридом беспрепятственно вошел во все сферы иммунологии, и сами авторы всемерно способствовали этому, предоставляя свою клеточную линию плазмоцитомы для исследований всем желающим. И первые гибридомы в нашей стране, полученные в 1979-1980 годах, были созданы на основе клеток, ведущих происхождение из лаборатории этих авторов и с их любезного разрешения.

    3.2.Создание  гибридом.
    В 1975 году была описана методика, позволяющая  получать клеточные линии (гибридомы), секретирующие отдельные разновидности антител (моноклональные антитела) с желаемой антигенной специфичностью. Это открытие определило бурный прогресс в использовании антител как для исследовательских, так и для практических целей, и в настоящее время "гибридомная технология" является одним из основных направлений в биотехнологии.
    Гибридомы являются бессмертными клеточными клонами, продуцирующие антитела одной специфичности. Гибридомы получают при слиянии  нормальных лимфоцитов, продуцирующих антитела, с подходящей опухолевой линией B- клеток. Затем гибридомы отбирают в культуральной среде, неспособной поддерживать рост родительских клеток (среда ГАТ). Путем последовательных разведений и пересевов получают одиночные клоны, которые можно выращивать в роллерных культурах или в форме асцита в брюшной полости мышей. В последнем случае удается получать особенно высокие титры моноклональных антител. При этом, естественно, все молекулы иммуноглобулинов, продуцируемые определенной гибридомой, идентичны: они относятся к одному классу и одному аллотипу, имеют одинаковые вариабельные области, структуру, идиотип, аффинность и специфичность к данному эпитопу.
    Для получения гибридом применяются клетки миеломы - линии клеток, производящих моноклональные антитела определенной специфичности. Поскольку эти клетки осуществляют эффективную секрецию рекомбинантных белков, они хорошо изучены в отношении экспрессии в них соответствующих рекомбинантных генов, введенных с помощью трансфекции.  
 

    
Здесь представлена общая схема получения моноклональных антител методом гибридомной технологии. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

    3.3.Банки  гибридом.
    Для успешного сохранения выведенных видов  гибридом, для дальнейших научных  изысканий, для бесперебойного производства моноклональных антител создаются  банки гибридом – специальные учреждения для хранения культур гибридомных клеток, подвергнутых криоконсервации.
    Крупнейшим  банком гибридом (и официально на то уполномоченным на территории РФ) является Институт цитологии Российской Академии Наук, в котором при Отделе клеточных культур функционирует Коллекция клеточных культур.
    Коллекция клеточных культур Института  цитологии РАН основана в 1978 году. Основным организатором является руководитель отдела клеточных культур, профессор  Георгий Петрович Пинаев. На протяжении 27 лет происходит непрерывное расширение и совершенствование ее фондов. В фондах Коллекции культур клеток позвоночных содержится около 200 клеточных линий и 690 гибридом, которые представлены в виде 300 000 ампул, хранящихся в жидком азоте в криобанке. Коллекция обладает уникальным комплексом оборудования, приборов и устройств, обеспечивающих ее деятельность. Коллекция является Центром коллективного пользования, обеспечивая образцами коллекционного клеточного материала учреждения Санкт-Петербурга, России и стран СНГ.
    Коллекция клеточных культур ИНЦ РАН является Центральным банком, официальным органом по депонированию новых клеточных линий и гибридом, а также научно-методическим центром Российской коллекции клеточных культур. Коллекция является членом общественной организации "Ассоциация специалистов по клеточным культурам". Президентом этой организации является Г. П. Пинаев, вице-президентом - Г. Г. Полянская. Российская коллекция клеточных культур является членом Европейской Ассоциации клеточных культур (ECCO) и Всемирной Федерации Коллекций Культур. Информация о фондах Коллекции представлена в Международном Каталоге линий Human and animal cell lines catalogue, 1993 (Interlab. project). Данные об имеющихся в Коллекции гибридомах включены в Международную базу данных Всемирной Федерации Коллекций Культур.
    Направления работы:
    Поддержание и развитие Коллекции культур клеток позвоночных.
    Получение и характеристика постоянных линий эмбриональных стволовых клеток человека.
    Сравнительный анализ кариотипической изменчивости в клеточных линиях с разной структурой кариотипа при длительном культивировании в разных условиях.
    Основные  задачи, решаемые в  процессе работы Коллекции:
    Развитие и непрерывное поддержание фондов Коллекции путем сбора, выведения, паспортизации и хранения клеточных линий человека и животных. В рамках расширения фондов Коллекции ведется работа по получению постоянных линий эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) человека, являющихся перспективным материалом, как для фундаментальных, так и для биомедицинских исследований.
    Разработка типового паспорта и единых требований к качеству коллекционного клеточного материала, согласно требованиям, принятым в Международной федерации Коллекций Культур. Паспортизация клеточных линий включает описание условий культивирования и криоконсервации, определение жизнеспособности клеток, их морфологии, видовой идентификации клеточных линий с помощью кариологического и изоферментного анализа; микробиологический контроль клеточных линий; помимо классических микробиологических методов контроля, для определения микоплазменной контаминации применяется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием специфических праймеров к рибосомальному гену микоплазм. Работы с ЭСК человека требуют использования специальных методов культивирования и характеристики недифференцированных ЭСК и полученных из них различных типов дифференцированных клеток. К таким методам, в частности, относятся иммуно-флуоресцентный, цитохимический и молекулярно-биологический анализы ЭСК человека.
    Депонирование уникальных клеточных линий и гибридом, патентуемых в связи с их практической ценностью.
    Постоянное совершенствование работы с коллекционными клеточными культурами на основе проведения многолетних научных исследований, посвященных изучению влияния условий культивирования, криоконсервации и контаминации на генетическую изменчивость клеточных линий. В результате проведения многолетних исследований по кариотипической изменчивости в разных клеточных линиях установлен ряд закономерностей, обеспечивающих образование сбалансированной кариотипической структуры клеточной популяции как единой автономной системы в условиях in vitro.
    Создание информационных баз данных по клеточным культурам и постоянно действующей службы информации путем регулярного издания информационного бюллетеня. Начиная с 1986 года, издано 20 выпусков бюллетеня "Клеточные культуры". В 1991 году был выпущен первый каталог клеточных линий Всесоюзной коллекции клеточных культур. В 1999 году выпущен расширенный каталог Российской коллекции клеточных культур на русском и английском языках объемом 429 страниц (РККК).
    Обеспечение образцами стандартного и полностью охарактеризованного клеточного материала фундаментальных и прикладных биологических, медицинских, сельскохозяйственных и биотехнологических исследований. Ежегодно выдается более 150 образцов клеточных линий в многочисленные организации Санкт-Петербурга, других регионов России и стран СНГ.
    Оказание научно-методической помощи сотрудникам научных учреждений страны по методам культивирования и анализу клеточных линий путем проведения стажировок, а также путем издания методических руководств, проведения конференций, совещаний и школ.
 
    4.применение  моноклональных антител.
    4.1.Что  такое моноклональные  антитела.
    Моноклональные  антитела — антитела, вырабатываемые иммунными клетками, принадлежащими к одному клеточному клону, то есть произошедшими из одной плазматической клетки-предшественницы. Моноклональные антитела могут быть выработаны на почти любое вещество (в основном белки и полисахариды), которое антитело будет специфически связывать.
    Они могут быть далее использованы для  детекции(обнаружения) этого вещества или его очистки. Моноклональные антитела широко используются в биохимии, молекулярной биологии и медицине. В случае их использования в качестве лекарства его название оканчивается на -mab (от английского «monoclonal antibody»).
    4.2.Метод  получения.
    На  настоящий момент единственным успешным методом создания моноклональных антител  является метод гибридомной технологии. Технология лимфоидных гибридом была разработана в 1975 году Мильштейном и Келлером, и уже к 1977 году ими было получено 16 типов гибридом, синтезирующих различные типы моноклональных антител. Первоначально гибридомная технология строилась на основе следующих разработок: имелись линии миеломных клеток мышей balb/c (дефектные по некоторым ферментам метаболизма нуклеиновых кислот, что являлось необходимым условием для селекции получаемых гибридом), полученные в результате развития методов получения миелом, посредством введения инертного пластика и минеральных масел в виде подкожных инъекций мышам; разработаны методы слияния клеток с помощью вирусов (вирус Сендай) и полиэтиленгликоля; разработаны методики избирательной селекции клеток с помошью среды ГАТ. Главной заслугой Мильштейна и Келлера явилась непосредственно разработка методики, а также возможность использования получаемых гибридом для широкомасштабного производства моноклональных антител.
    На  настоящий момент данная технология не претерпела практически никаких  изменений. В качестве клеток-носителей все чаще начинают использование клеток других типов, полученных либо от организма одного вида, либо даже от разных видов. Разработка подобных методов позволяет не только изучить особенности функционирования клеток как таковых, но и имеет колоссальный практический интерес, т.к. позволяет решить проблему получения человеческих гибридом.
    4.3.Применение  моноклональных антител.
    Обычные поликлональные антитела давно и  широко применяются для определения  биологически активных веществ - белков крови и других биологических жидкостей, гормонов, ростовых факторов, клеточных рецепторов, медиаторов воспаления и иммунитета, бактериальных и вирусных антигенов, различных ядов и т.п. Моноклональные антитела из-за высочайшей специфичности, стандартности и технологичности получения успешно вытесняют и заменяют иммунные сыворотки.
    На  современном этапе созданы десятки  тысяч высокоаффинных антител, связывающихся  с белками, углеводами, нуклеиновыми кислотами, а также низкомолекулярными антигенами. На их основе получены коньюгаты  с различными функциональными соединениями, токсинами, ферментами, магнитными частицами, радиоактивными и рентгеноконтрастными атомами и т.п. Эти коньюгаты находят широчайшее применение в научных исследованиях, медицине, ветеринарии. Описаны примеры получения с помощью указанной технологии антител, обладающих каталитической активностью, так называемых абзимов (abzyme от англ. antibody и enzyme).
    И. Хиггинс в 1988г. предложил  следующие области  применения моноклональных антител:
и т.д.................


Перейти к полному тексту работы


Скачать работу с онлайн повышением уникальности до 90% по antiplagiat.ru, etxt.ru или advego.ru


Смотреть полный текст работы бесплатно


Смотреть похожие работы


* Примечание. Уникальность работы указана на дату публикации, текущее значение может отличаться от указанного.