Здесь можно найти образцы любых учебных материалов, т.е. получить помощь в написании уникальных курсовых работ, дипломов, лабораторных работ, контрольных работ и рефератов. Так же вы мажете самостоятельно повысить уникальность своей работы для прохождения проверки на плагиат всего за несколько минут.

ЛИЧНЫЙ КАБИНЕТ 

 

Здравствуйте гость!

 

Логин:

Пароль:

 

Запомнить

 

 

Забыли пароль? Регистрация

Повышение уникальности

Предлагаем нашим посетителям воспользоваться бесплатным программным обеспечением «StudentHelp», которое позволит вам всего за несколько минут, выполнить повышение уникальности любого файла в формате MS Word. После такого повышения уникальности, ваша работа легко пройдете проверку в системах антиплагиат вуз, antiplagiat.ru, etxt.ru или advego.ru. Программа «StudentHelp» работает по уникальной технологии и при повышении уникальности не вставляет в текст скрытых символов, и даже если препод скопирует текст в блокнот – не увидит ни каких отличий от текста в Word файле.

Результат поиска


Наименование:


реферат Синтез органических кислот

Информация:

Тип работы: реферат. Добавлен: 27.11.2012. Сдан: 2012. Страниц: 10. Уникальность по antiplagiat.ru: < 30%

Описание (план):


?

                        Министерство образования Республики Беларусь

       УО «Гродненский государственный университет имени Янки Купалы»

 

                                        

Реферат на тему:

           

Синтез органических кислот

                                                                           

                                                                           

 

                                                                             студентки 5 курса, 2 группы

                                                                             факультета биологии и экологии

                                                                              Новицкой Екатерины Николаевны

                            

 

                                                Гродно, 2011


Содержание.
Введение………………………………………………………………………………………….3
Получение органических кислот из углеводов………………………………………………...4
Лимонная кислота…………………………………..……………………………………………5
История создания производства лимонной кислоты….............................................................5
Продуценты лимонной кислоты………..………………………………………………………6
Производство лимонной кислоты…............................................................................................7
Механизм биосинтеза……………………………………………………………………………9
Сверхсинтез лимонной кислоты…………………………………………………………….…10
Уксуснокислые бактерии…........................................................................................................10
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Введение.
Производство органических кислот методом микробиологического синтеза — относительно молодая отрасль промышленности. Исключение составляет производство уксусной кислоты, которую вырабатывают из винного спирта микробиологическим путем очень давно. Получение других органических кислот, в первую очередь лимонной кислоты, с помощью микроорганизмов началось в 20—30-е годы нашего века. Пищевые кислоты до этого выделяли в ограниченном количестве из естественных источников, лимонную кислоту — из сока лимонов, винную — из винного камня (отхода винодельческого производства).
Современное производство органических кислот, существующее в большинстве промышленно развитых стран, основано главным образом на использовании в качестве продуцентов различных штаммов плесневых грибов, чаще всего Aspergillus niger. Источником углерода в этих процессах являются углеводы — кристаллические сахароза и глюкоза, свекловичная и тростниковая меласса, гидролизаты древесины, крахмалсодержащие материалы.
В последние годы внимание привлечено к непищевому сырью, такому, как этиловый спирт и жидкие парафины. Парафины нефти могут быть использованы для многих микробиологических синтезов, в том числе при синтезе органических кислот. Наиболее перспективными продуцентами органических кислот из парафинов признаны дрожжи.
Процессы микробиологического получения органических кислот иногда называют аэробным брожением. Однако такое определение не отражает физиологического смысла этого процесса для самого микроорганизма-продуцента. Согласно современным представлениям брожение определяется как тип метаболизма без участия молекулярного кислорода, при котором АТР образуется путем субстратного фосфорилирования. В свете этого процессы микробиологического синтеза уксусной, глюконовой, лимонной, фумаровой и ряда других органических кислот не могут быть определены как процессы брожения, поскольку их продуценты — аэробы и образование кислот осуществляется в условиях интенсивной аэрации. Указанные кислоты являются промежуточными продуктами метаболизма соединений углерода, в том числе интермедиатами цикла трикарбоновых кислот. Микробиологические способы получения органических кислот основаны на неполном окислении соединений углерода в аэробных условиях. Исключением является молочная кислота, которую получают в результате брожения.
Получение органических кислот из углеводов.
Способность продуцировать органические кислоты при росте на средах с углеводами широко распространена среди мицелиальных грибов родов Aspergillus (A. awamori, A. clavatus, A. fu-marlcus, A. itaconicus, A. japonlcus, A. niger, A. terreus, A. wen-til), Penicillium (P. chrysogenum, P, citrinum, P. citrogenum, P. luteum), и Rhizopus (R. nigricans, R. oryzae).
Грибы родов Aspergillus и Penicillium относятся к формальному классу дейтеромицетов, или несовершенных грибов (Deuteromycetes или Fungi imperfecti), порядку Hyphomycetales. Как аспергиллы, так и пенициллы широко распространены в природе. Многие виды аспергиллов и пенициллов ответственны за порчу пищевых продуктов (плодов, овощей, зерна, хлеба и др.), кожи, бумаги. Грибы обнаруживаются в виде плесневого налета, состоящего из вегетативного мицелия, несущего конидиеносцы с конидиями. Естественным резервуаром их является почва, причем аспергиллы более приурочены к почвам южных широт, а пенициллы — к почвам северных широт.
На поверхности питательных сред пенициллы и аспергиллы образуют плоские колонии, состоящие из вегетативного мицелия, стелющегося по поверхности и частично погруженного в субстрат. Мицелий чаще всего белого цвета, септированный, сильно разветвленный. На определенной стадии развития грибов образуются воздушные гифы, на которых развиваются конидиеносцы, несущие конидии, последние служат для размножения грибов.
Кроме того, размножение возможно обрывками вегетативного мицелия. Строение конидиеносцев у аспергиллов и пенициллов различно и используется как признак для идентификации родов и отдельных видов внутри рода (рис. 26.1).
Представители рода Rhizopus относятся к семейству Mucoraсеае (класс Zygomycetes). Эти грибы широко распространены в почве, на экскрементах травоядных животных и на всевозможных гниющих субстратах растительного происхождения. Грибы имеют сильно ветвящийся несептированный мицелий, частично погруженный в субстрат, частично стелющийся по поверхности. Кверху от мицелия поднимаются спорангиеносцы в виде толстых гиф, заканчивающихся шаровидным вздутием, внутри которого развиваются споры. Помимо бесполого размножения многоядерными спорангиспорами у этих грибов известно половое размножение зигоспорами. Некоторые грибы семейства мукоровых используются в качестве источника амилаз и протеаз.
 
 
Лимонная кислота.
Лимонная кислота — трехосновная оксикислота, широко распространена в природе, относительно много ее содержится в некоторых ягодах, фруктах, особенно в цитрусовых (в лимоне 5—8%), в листьях и стеблях некоторых растений.
Лимонную кислоту выделяют в виде лимоннокислого кальция из продуктов переработки листьев хлопчатника, стеблей махорки, хвои ели, плодов лимонов.
В Италии и Испании еще существует производство лимонной кислоты, основанное на осаждении цитрата кальция из сока лимонов. До 1930 г. Италия была основным поставщиком цитрата кальция в мире. В настоящее время лимонную кислоту производят во всех промышленно развитых странах методом микробиологического синтеза, мировая продукция кислоты составляет около 300 тыс. т в год.
Лимонная кислота благодаря своим вкусовым качествам и физико-химическим свойствам широко применяется в ряде отраслей пищевой промышленности: кондитерской (конфеты, желе), винодельческой, безалкогольных напитков, консервной, пищеконцентратов. Она используется в фармацевтической промышленности, в том числе при переливании крови, а также при приготовлении косметических средств. Лимонная кислота — прекрасный хелатирующий (комплексообразующий) агент, что позволяет широко использовать ее в процессах электрогальванизации, дубления кож, окраски тканей, приготовления чернил, очистки паровых котлов, изготовления синтетических моющих средств. Используется лимонная кислота в химической промышленности, в том числе при производстве алкидных смол, а ее эфиры служат пластификаторами при производстве лаков.
История создания производства лимонной кислоты.
В 1891 г. немецкий ученый Вемер установил способность плесневых грибов продуцировать органические кислоты. При выращивании A. nlger на среде с сахаром им было констатировано выделение щавелевой кислоты. Через два года Вемер обнаружил лимонную кислоту, накапливающуюся в среде- при выращивании грибов, названных им Citromyces (С. pfefferianus и С. glaber). Впоследствии Citromyces были отнесены к роду Peniclllium. Вемер пытался осуществить производство лимонной кислоты с помощью гриба из сахара. Работа окончилась неудачей в связи с рядом трудностей, непреодолимых в то время.
В 1917 г. американский ученый Кэрри сообщил о способности ряда штаммов A. niger продуцировать лимонную кислоту наряду с щавелевой. Это было важное открытие, поскольку в отличие от плохо растущих пенициллов А. niger характеризовался мощным и быстрым ростом. Штамм -гриба, с которым работал Кэрри, и условия ведения процесса были в дальнейшем использованы американской фирмой Пфайзер для организации в 1923 г. первого микробиологического процесса производства лимонной кислоты.
Работы Вемера и Кэрри вызвали большой интерес к изучению некоторых грибов и в первую очередь продукции ими органических кислот. В этом плане развернулись широкие исследования в различных странах, в том числе СССР, Англии, Чехословакии, США и Японии. В Советском Союзе работы по изучению физиологии и биохимии грибов и продукции ими органических кислот проводились в лабораториях В. С. Буткевича в Москве и С. П. Костычева в Ленинграде. Буткевичем было сделано принципиально важное открытие. Он показал, что, изменяя условия культивирования грибов, можно изменить их биохимическую активность и получить разные продукты. Так, при культивировании A. niger в присутствии СаС03 при рН среды, близком к 7,0, происходило преимущественное накопление глюконовой и щавелевой кислот, а в условиях высокой кислотности среды без СаСОз образовывалась практически одна лимонная кислота. Этот факт, впоследствии подтвержденный Костычевым, оказался принципиально важным для организации промышленного производства лимонной и глюконовой кислот не только в нашей стране, но и за рубежом.
Заслуга Бут.кевича состояла также в том, что он первый дал бесспорное доказательство образования лимонной кислоты из сахара. Благодаря работам Буткевича, Костычева, а также их учеников в Советском Союзе в начале 30-х годов было создано микробиологическое производство лимонной кислоты с помощью A. niger. В 1935 г. в Ленинграде был пущен первый в стране специализированный завод, производящий лимонную кислоту.
К началу 30-х годов производство лимонной кислоты «биохимическим» способом было организовано также в Бельгии, Чехословакии, Франции, а затем и в других странах.
Продуценты лимонной кислоты.
Способность образовывать лимонную кислоту при росте на средах с углеводами — свойство, широко распространенное среди мицелиальных грибов. Для получения лимонной кислоты в лабораторном и промышленном масштабе использовали грибы рода Aspergillus (в том числе виды A. awamori; A. clavatus, A. furna-ricas, A. japonicus, A. niger, A. wentii), рода Penicillium (в том числе P. chrysogenum, P. citrinum, P. citrogenutn, P. luteum), а также Botrytis cinerea, Paecilomyces divaricatum, Mucor piriformis, Polyporus anceps и некоторые другие.
В настоящее время в качестве продуцента лимонной кислоты применяются различные штаммы A. niger. Используемые в производстве штаммы отличаются большой скоростью роста, легкостью культивирования и высоким выходом лимонной кислоты.
До недавнего времени в производстве использовали специально селекционированные штаммы гриба, выделенные из природных источников. Последние, два десятилетия в качестве продуцентов все шире применяются экспериментально полученные му-тантные штаммы, отличающиеся от природных рядом положительных свойств, в первую очередь более высоким выходом целевого продукта.
Производство лимонной кислоты.
При производстве лимонной кислоты применяются три способа ферментации: 1) культивирование продуцента на поверхности твердой питательной среды (твердофазная ферментация); 2) поверхностное культивирование на жидкой среде; 3) погруженное глубинное культивирование.
Культивирование на поверхности твердой среды. Гриб-продуцент (A. niger) выращивают в неглубоких лотках на поверхности влажных отрубей риса или пшеницы. Во время ферментации рН массы отрубей падает до 1,8—2,0. После окончания процесса лимонная кислота вместе с небольшим количеством одновременно образовавшихся глюконовой и щавелевой кислот экстрагируется водой, а затем осаждается в виде соли кальция. В связи с тем, что отруби богаты железом и другими микроэлементами, используют штаммы A. niger, не чувствительные к высоким концентрациям металлов. Такой наиболее простой метод получения лимонной кислоты применяется только в Японии.
Поверхностное культивирование на жидкой среде. Метод поверхностного культивирования широко используется для производства лимонной кислоты в странах Европы и Америки. Поверхность жидкой среды, разлитой в неглубокие кюветы, засевают конидиями гриба-продуцента. Кюветы размещают на стеллажах в термостатированных «бродильных камерах». Гриб развивается в виде плотной пленки на поверхности питательной среды, содержащей высокие концентрации сахара. Образующаяся лимонная кислота переходит из клеток мицелия в раствор, из которого после окончания процесса ее осаждают в виде кальциевой соли, а затем переводят в форму свободной кислоты и кристаллизуют.
Получение посевного материала (спор гриба) проводят в споровом цехе. Такие цехи, имеющиеся только на некоторых заводах, обеспечивают посевным материалом все предприятия. Приготовление питательной среды и превращение сахара грибом в лимонную кислоту, а также последующее отделение мицелия осуществляется в «бродильном цехе». Выделение лимонной кислоты из «сброженных» растворов и получение ее в кристаллическом виде производят в химическом цехе.
В качестве продуцентов лимонной кислоты поверхностным методом на большинстве заводов нашей страны, а также на ряде фирм за рубежом используются мутантные штаммы A. niger (например, Р-1 и Р-3).
Производство посевного материала осуществляют в стерильных условиях следующим образом. Споры исходной музейной культуры высевают на поверхность агаризованной питательной среды, разлитой в алюминиевые кюветы площадью 10—12 дми, последние помещают в термостат. На поверхности среды формируется плотная пленка мицелия, которая затем покрывается конидиями. Через 10 сут. пленки просматривают и отбраковывают .те из них, в которых обнаружено незрелое спороношение или инфекция. С поверхности мицелия споры собирают с помощью устройства, работающего по принципу пылесоса, споры просушивают в термокамере при 28—30 °С, смешивают со стерильным активированным углем в отношении 1:2, расфасовывают в стерильные колбы и банки емкостью 0,5—1,0 л, закрывают ватными пробками и сохраняют при комнатной температуре. Срок годности спор 6 мес. В таком виде посевной материал (споры) передается на заводы, производящие кислоту.
Выращивание гриба осуществляют в плоских кюветах (высота бортов до 20 см), расположенных одна над другой на стеллажах в «бродильной камере» (рис. 26.3). В зависимости от размера камеры в ней могут быть расположены два или более стеллажа. На каждом стеллаже размещается 8—10 кювет, расстояние между которыми (по вертикали) 30—40 см. Кюветы изготовляют из нержавеющей стали или чистого алюминия — материалов не подвергающихся коррозии и не загрязняющих среду ионами Fe. Заполнение кювет стерильной средой и слив из них сброженного раствора производится через штуцер в дне кюветы, соединенный шлангом с общим стояком, находящимся вне камеры. Камера оборудована системой приточно-вытяжной вентиляции, обеспечивающей подачу стерильного воздуха необходимой температуры и влажности. Воздух равномерно распределяется по всей камере.
Среду готовят в специальном отделении. В качестве источника углерода в нее вносят сахарозу. При организации первых производств лимонной кислоты сырьем служил кристаллический свекловичный сахар. В 50-е годы на заводах в нашей стране сахар был заменен на свекловичную мелассу (отход сахарного производства). Меласса содержит от 43 до 49% сахарозы, отличается сложностью и непостоянством химического состава. Она содержит большое количество микроэлементов, в первую очередь железо, угнетающее образование кислоты грибом. Поэтому" перед введением в среду мелассу необходимо освободить от ионов металлов. В США мелассу освобождают от металлов с помощью катионообменных смол. В СССР обычно применяется обработка мелассы желтой кровяной солью (KiFe(CN)6) с последующим кипячением раствора. В результате соли железа и других тяжелых металлов осаждаются и их удаляют из раствора сахара.
Подготовленные стерильные кюветы заполняют стерилизованной средой (высота слоя жидкости 12 см) и засевают спорами гриба. Конидии, нанесенные на поверхность питательного- раствора, прорастают, образуется мицелий гриба и прочная пленка, покрывающая всю поверхность раствора. Максимальная интенсивность роста мицелия наблюдается примерно на 4-е сух, что сопровождается активным тепловыделением и образованием СОг. В процессе ферментации происходит постепенное нарастание общей кислотности. Начальное значение рН среды 6,8—7,0 снижается в течение первых трех суток до 4,5, а к концу процесса до 3,0.
Механизм биосинтеза.
Лимонная кислота образуется А. niger (и другими грибами) в цикле трикарбоновых кислот (ЦТК) в результате конденсации оксалоацетата и ацетил-КоА, осуществляемой цитрат-синтазой.
Необходимые для реакции оксалоацетат и ацетил-КоА образуются из двух молекул пирувата: одна молекула пирувата подвергается декарбоксилированию с образованием ацетил-КоА, вторая — карбоксилируется, давая оксалоацетат. Пируват образуется по фруктозобисфосфатному пути (пути Эмбдена, Мейр-гофа — Парнаса). Все ферменты этого пути, а также пируватде-гидрогеназа, пируваткарбоксилаза и цитрат-синтаза обнаружены у A. niger. Полагают, что аконитат-гидратаза (аконитаза) и изоцитрат-дегидрогеназа, ответственные за метаболизм лимонной кислоты в ЦТК, хотя и присутствуют в клетках гриба в период синтеза этой кислоты, однако их активность ограничена дефицитом ионов металлов (Fe, Мп), низким значением рН среды, а также рядом образовавшихся метаболитов. Аконитат-гидратаза — железо-протеин: для ее активации необходим ион Fe2+, а ингибитором фермента является Н2О2, накапливающаяся в Fe-дефицитных клетках гриба. В отношении изоцитратдегидрогеназы установлено, что ферроцианид калия ингибирует этот фермент. В связи с этим становится понятным положительный эффект присутствия избытка данной соли в среде на процесс накопления кислоты. Другим ингибитором изоцитратдегидрогеназы служит лимонная кислота, накапливающаяся в клетках в высокой концентрации и угнетающая активность фермента.
Таким образом, представления в отношении причин сверхсинтеза грибами лимонной кислоты можно суммировать следующим образом. Лимонная кислота — обычный метаболит ЦТК и в небольшом количестве присутствует в клетках разных микроорганизмов. Некоторые грибы (в первую очередь Л. niger) способны синтезировать огромные количества этой кислоты. Сверхсинтез лимонной кислоты происходит при лимитировании роста грибов-продуцентов минеральными компонентами среды и одновременном избыточном содержании источника углерода.
Сверхсинтез лимонной кислоты.
Способность различных грибов, в том числе A. niger, продуцировать лимонную кислоту проявляется в строго определенных условиях культивирования. Как правило, культуры грибов при избытке питательных веществ не накапливают лимонной кислоты, а образуют значительную биомассу и окисляют сахар до СОг и Н20. Синтез лимонной кислоты грибом-продуцентом осуществляется обычно на средах с высокой концентрацией углевода (5—20%). Наилучшим субстратом для A. niger является сахароза.
Накопление кислоты имеет место при ограничении роста гриба одним из минеральных компонентов среды (Fe, Mn, P, N) или несколькими компонентами одновременно. Преимущественное образование лимонной кислоты происходит при культивировании продуцента при низком значении рН среды. В таких условиях синтез других органических кислот подавляется. Процесс кислотообразования осуществляется в условиях достаточного обеспечения культуры молекулярным кислородом.
В процессе ферментации, как принято называть микробиологические производства, можно выделить две фазы: 1) активного роста гриба и 2) интенсивного кислотообразования, рост мицелия в этот период становится незначительным.
Уксуснокислые бактерии.
Уксуснокислые бактерии относятся к грамотрицательиым аэробным хемоорганогетеротрофам. От других бактерий, обладающих указанными свойствами, они отличаются способностью активно осуществлять разнообразные окислительные трансформации первичных спиртов, гликолей, полиолов, альдо- и кетоса-харов, а также их производных. К настоящему времени известно более восьмидесяти подобных трансформаций, производимых уксуснокислыми бактериями, в том числе окисление этилового спирта до уксусной кислоты, глюкозы до 2- и 5-кетоглюконовых кислот, превращение глицери
и т.д.................


Перейти к полному тексту работы


Скачать работу с онлайн повышением уникальности до 90% по antiplagiat.ru, etxt.ru или advego.ru


Смотреть полный текст работы бесплатно


Смотреть похожие работы


* Примечание. Уникальность работы указана на дату публикации, текущее значение может отличаться от указанного.